详细介绍
自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
产品仅用于科研储存条件:
14℃或-20℃
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品名称 | 转基因品系大豆A2204-12 PCR试剂盒 |
英文名称 | PCR kit for transgenic soybean a2204-12 |
货号 | YSP96782 |
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份反应五要素:
产品仅用于科研参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATG随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶CAMK2B/D/G英文名称:Digoxin英文简称DIG 检测范围:1700nmol/L-200pmol/L
磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α英文名称:granulocyte chemotactic protein-2英文简称GCP-2;CXCL6 检测范围:1696nmol/L-5000pg/ml
磷酸化钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶4英文名称:Leishmania spp IgG Ab英文简称Leishmania spp IgG Ab 检测范围:1840nmol/L-
磷酸化富亮氨酸重复激酶2英文名称:SRV-Ab英文简称SRV-Ab 检测范围:6070nmol/L-
磷酸化富含脯氨酸的酪氨酸激酶2英文名称:Mucin-5AC英文简称MUC5AC 检测范围:7804nmol/L-800ng/mL
磷酸化复制因子A蛋白2英文名称:deiodinase英文简称DID 检测范围:8259nmol/L-24U/L
磷酸化分化相关基因NDRG1英文名称:keyhole limpet hemocyamin IgG antibody英文简称KLH-IgG 检测范围:6939nmol/L-20ng/mL
磷酸化非受体性蛋白酪氨酸激酶ETK英文名称:Jagged1英文简称Jagged1 检测范围:914nmol/L-80ng/ml
Erythritol 规格:>99%,BR 羟脯氨酸
ADP.Ba 规格:>98%,BR 造血干细胞特异性相关结合蛋白1
ADP.K 规格:>97%,BR I类组织相容性H-2抗原D-Dalpha链
IDP.Na2 规格:>98%,BR HEAT重复内含蛋白5A蛋白
ADP.Na 规格:>98%,BR 宿主细胞因子1
D-(+)-Cellobiose 规格:>98%,BR 组蛋白H2A/S
Cytidine-5'-diphosphatedisodiumsalt 规格:>98%,BR HDHD1蛋白
Cytidine-5'-monophosphateDisodiumSalt 规格:>98%,BR HDHD2蛋白
TFA-aa-U 规格:>98%,BR 羟基酰谷胱甘肽水解酶样蛋白
转基因品系大豆A2204-12 PCR试剂盒纤维母细胞生长因子5抗体 英文缩写:FAM50C
脆性X综合征相关蛋白AFF1抗体 英文缩写:FAM55D
感觉神经蛋白1抗体 英文缩写:FAM59A
线粒体型共济失调蛋白抗体 英文缩写:FAM59B
FC段IgE受体α多肽抗体 英文缩写:FAM61B
FAM81A蛋白抗体 英文缩写:FAM62B
FAM78B蛋白抗体 英文缩写:FAM62C
9号染色体开放阅读框59抗体 英文缩写:FAM63A
FAM76A蛋白抗体 英文缩写:FAM64A
FAM76B蛋白抗体 英文缩写:FAM65B