详细介绍
产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品名称 | 转基因品系棉花GHB119 PCR试剂盒 |
英文名称 | Ghb119 PCR kit for transgenic cotton |
货号 | YSP96819 |
自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
产品仅用于科研不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
水通道蛋白12B(AQP12B) 规格:100mg 英文:NR-2
水通道蛋白7(AQP7) 规格:100mg 英文:OFQ/N
水通道蛋白8(AQP8) 规格:1g 英文:Lebtospira
牛血清白蛋白(BSA) 规格:0.2g 英文:Leptospira
牛痘相关激酶1(VRK1) 规格:0.2g/支 英文:LepIgG
牛磺酸转运蛋白(TAUT) 规格:3g 英文:TR
毛状样蛋白1(COTL1) 规格:1ml 英文:Testoterone
毛细血管扩张性共济失调突变因子(ATM) 规格:100mg 英文:T
毛透明蛋白(TCHH) 规格:50mg 英文:HVA
反三碘甲状腺原氨酸(rT3) 规格:20mg 英文:MHB
反式高尔基体网状结构蛋白2(TGOLN2) 规格:20mg 英文:hCG
反胰岛素样生长因子2(IGF2AS) 规格:100mg 英文:HMG-17
反胰岛素样生长因子2(IGF2AS) 规格:1g 英文:HMGB-1
反胰岛素样生长因子2(IGF2AS) 规格:50mg 英文:HMGB1
分层蛋白(SFN) 规格:20mg 英文:u-T3
Eupalitin阿扎哌隆 分子式:C10H6ClNO2 纯度:99.0%
Luteolin 5-methyl ether盐酸阿扎司琼 分子式:C7H5ClN2S 纯度:99.0%
Kaempferol 3-O-sophoroside氮卓斯汀碱 分子式:C14H15N3 纯度:99.0%
Violanone杆菌肽锌 分子式:C11H8O3 纯度:99.0%
Luteolin 5,3'-dimethyl ether盐酸贝那普利/苯那普利 分子式:C12H10O4 纯度:95.0%
Kaempferol 3-O-sophoroside-7-O-glucoside盐酸贝那普利/苯那普利(标准品) 分子式:C19H24O3 纯度:99.0%
(2S)-Pinocembrin 7-O-[2''-O-(5'''-O-trans-cinnamoyl)-β-D-apiofuranosyl]-β-D-glucoside苯扎贝特 分子式:C6H12N2O 纯度:98.0%
Cryptomerin B苯扎贝特(标准品) 分子式:C14H15NO 纯度:98.0%
Kayaflavone布南色林 分子式:C6H8O3 纯度:98.0%
转基因品系棉花GHB119 PCR试剂盒G蛋白偶联受体GPR37样蛋白1抗体 英文缩写:Fumarate hydratase
G蛋白偶联受体GPR105蛋白抗体 英文缩写:FUNDC1
G蛋白偶联受体GPR12蛋白抗体 英文缩写:Furin
G蛋白偶联受体GPR110蛋白抗体 英文缩写:FUS
G蛋白偶联受体GPR125蛋白抗体 英文缩写:FUSIP1
G蛋白偶联受体RTA蛋白抗体 英文缩写:FUT1
G蛋白偶联受体GPR155蛋白抗体 英文缩写:FUT11
G蛋白偶联受体GPR30蛋白抗体 英文缩写:FUT2
G蛋白偶联受体GPR86蛋白抗体 英文缩写:FUT3/CD174
G蛋白偶联受体HM74蛋白抗体 英文缩写:Fut4/CD15/SSEA-1(Stage-specific embryonic surface antigen 1)
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATG随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。