详细介绍
产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品名称 | 转基因品系油菜45A37 PCR试剂盒 |
英文名称 | PCR kit for transgenic rape 45a37 |
货号 | YSP96849 |
自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
产品仅用于科研不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
Syntabulin蛋白(SYBU) 规格:20mg 英文:ERP29/C12orf8/ERP28
S抗原(SAG) 规格:100mg 英文:visfatin
Tafazzin蛋白(TAZ) 规格:100mg 英文:visfatin
Talanin蛋白(TALN) 规格:2mg/瓶 英文:vaspin
Talpid3蛋白(Talpid3) 规格:100mg 英文:GC
TANK结合激酶1(TBK1) 规格:100mg 英文:esRAGE
TAO激酶1(TAOK1) 规格:100mg 英文:EL
TAO激酶2(TAOK2) 规格:20mg 英文:ES
TAO激酶3(TAOK3) 规格:100mg 英文:eNOS-3
Taperin蛋白(TPRN) 规格:50mg 英文:eNOS
TATA框结合蛋白关联因子1(TAF1) 规格:50mg 英文:eNOS-3
TATA框结合蛋白关联因子12(TAF12) 规格:1g 英文:eNOS
TATA框结合蛋白关联因子13(TAF13) 规格:50mg 英文:ESM-1
TATA框结合蛋白关联因子2(TAF2) 规格:20mg 英文:ENG/CD105
TATA盒结合蛋白(TBP) 规格:100mg 英文:EDN2
Fangchinoline加替沙星 分子式:C9H14N4O3 纯度:99.0%
Stachydrine hydrochloride加替沙星(标准品) 分子式:C13H14N2O3 纯度:99.0%
Bilirubin吉非替尼 分子式:C7H7N3 纯度:99.0%
Lycorine吉非替尼(标准品) 分子式:C12H12O2 纯度:98.0%
Adenine盐酸吉西他滨 分子式:C13H11N 纯度:99.0%
Brevi* F盐酸吉西他滨(标准品) 分子式:C4H8N2S 纯度:98.0%
Benzylamine hydrochloride甲磺酸吉米沙星 分子式:C9H11NO 纯度:98.0%
Tryprostatin A甲磺酸吉米沙星(标准品) 分子式:C19H23N3 纯度:98.0%
14-Norpseurotin A胆酸钠 分子式:C17H27N3O4S 纯度:98.0%
转基因品系油菜45A37 PCR试剂盒促代谢型谷氨酸受体2抗体 英文缩写:Gentamicin(3G7)
G蛋白修补结构域蛋白5抗体 英文缩写:Gentamicin/BSA
β1-6 N-乙酰氨基葡萄糖转移酶6抗体 英文缩写:Gentamicin/FITC
牛磺酸/β-氨基乙磺酸抗体 英文缩写:Gentamicin/OVA
赤霉素抗体 英文缩写:Gephyrin
鸟嘌呤核苷酸结合蛋白X抗体 英文缩写:GFAP
GRAM结构域蛋白2抗体 英文缩写:GFAP delta
γ-谷氨酰转移酶轻链2抗体 英文缩写:GFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein)
原钙粘蛋白γA1抗体 英文缩写:GFI1
G蛋白偶联受体70抗体 英文缩写:GFI1B
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATG随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。