详细介绍
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作,必能得出准确的实验结果,可提供免费技术咨询服务!
产品名称:SCAMP3免费代测试剂盒
英文名称:secretory carrier membrane protein 3
检测范围:62.5pg/ml~2000pg/ml
货号:YS-E989291
保存条件:2-8℃低温保存
保质期:6个月,所有试剂盒均提供批次。
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。
选型:
产品规格:96T/48T
96T指可以做94个标本-2个标准对照-84个样本
48T指可以做47个标本-1个标准对照-42个样本
主要成分:酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属:马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..
试剂盒组成:
1 | 20 倍浓缩洗涤液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1 瓶 | 8 | 标准品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12 孔×8 条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 说明书 | 1 份 |
5 | 显色剂 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 张 |
6 | 显色剂 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 个 |
样本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 号标准品 | 150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
1200ng/L | 4 号标准品 | 150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
600ng/L | 3 号标准品 | 150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
300ng/L | 2 号标准品 | 150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
150ng/L | 1 号标准品 | 150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
实验注意事项:
1、手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
2、自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套试剂才能保证检测效果,因为所有试剂都是有关联的,不能混用其他商的产品。只有严格遵守KA&M-BIO试剂盒的说明操作才会得到的检测结果。
4、在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
5、浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
6、刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
7、所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
8、有效期:6个月。
MDA-MB-231, 癌细胞N-乙酰氨基葡萄糖(标准品)质量规格:>98%,标准品N-Acetyl-D-Glucosamine
非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H157 大鼠成纤维细胞*培养基 100mL托吡卡胺(标准品)质量规格:含量测定Tropicamide
H-4-II-E 大鼠肝细胞瘤细胞奥拉西坦(标准品)质量规格:供检查用Oxiracetam
CD28 Others Human CD28 细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸贝凡洛尔(标准品)质量规格:含量测定Bevantolol
615小鼠前胃癌瘤株;Fc盐酸奥昔布宁(标准品)质量规格:含量测定Oxybutynin HCl
TNFSF10 Protein Human 重组 TNFSF10 / AIL / APO-2L / CD253 蛋白布里杰35,英文名或英文缩写:Brij-35,级别:BR,70%,规格:100毫克
上皮细胞(HMEpiC) (5×105) THP-1单核白血病细胞 Human2-肖基本安(易制暴) 2-nitnocnilinq
胚肾细胞;293 Cells, low passageα-D-半乳糖苷半乳糖水解酶,英文名或英文缩写:α-Galactosidase preparation from green coffee beans,级别:标准品,7万u/mg,规格:5克
SEZ6L2 Others Human SEZ6L2 / PSK-1 细胞裂解液 (阳性对照) 龙胆酸,英文名或英文缩写:DHB,级别:高,98%,规格:100克
CL-0392NCI-H2087(非小细胞肺腺癌细胞)5×106cells/瓶×2554-95-0均本三 95%Trimesic acid
HL-60, 早幼粒白血病细胞 单核细胞-巨噬细胞,RAW264.7细胞 Hep G2(肝癌细胞)1,4-二(4-甲基-5本基-2-咪唑)本1克2~8℃,避光
小鼠神经母细胞瘤细胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]Perilloxin Perilloxin (HPLC,≥98%) 263249-77-0 5MG 通用试剂
HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 细胞裂解液 (阳性对照) 流化亚铁;流化铁 Iron sulfidq 1317-37-9
EB病毒转化的B细胞;KM932三氧化二锑10克RT
6. 肠胃细胞系统成套pH缓冲剂NA
SCAMP3免费代测试剂盒滋养层绒毛细胞总RNAHVT NA偏苯三1(>95.0%(T))Trimellitic Anhydride质量规格:>95.0%(T)
小鼠神经皮质细胞(MN-c)(1×106)2,4-二氨基-6-异丙氧基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))2,4-Diamino-6-isopropoxy-1,3,5-triazine质量规格:>98.0%(T)
家猫皮肤细胞;FCA-S12,4-二氨基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))2,4-Diami*,3,5-triazine质量规格:>98.0%(T)
小鼠B细胞杂交瘤细胞;W6/32 小鼠成年表皮角质形成层细胞*培养基 100mL2,4-氨基-6-甲氧基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))2,4-Diamino-6-methoxy-1,3,5-triazine质量规格:>98.0%(T)
SF9, 昆虫卵巢细胞 其它2,4-二氨基-6-二甲氨基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))2,4-Diamino-6-dimethylami*,3,5-triazine质量规格:>98.0%(T)
使用方法:
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。|
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。