详细介绍
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作,必能得出准确的实验结果,可提供免费技术咨询服务!
产品名称:环指蛋白180免费代测试剂盒说明
英文名称:Ring Finger Protein 18
检测范围:1.5μg/mL~48μg/mL
货号:YS-E987518
保存条件:2-8℃低温保存
保质期:6个月,所有试剂盒均提供批次。
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。
选型:
产品规格:96T/48T
96T指可以做94个标本-2个标准对照-84个样本
48T指可以做47个标本-1个标准对照-42个样本
主要成分:酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属:马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..
试剂盒组成:
1 | 20 倍浓缩洗涤液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1 瓶 | 8 | 标准品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12 孔×8 条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 说明书 | 1 份 |
5 | 显色剂 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 张 |
6 | 显色剂 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 个 |
样本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 号标准品 | 150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
1200ng/L | 4 号标准品 | 150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
600ng/L | 3 号标准品 | 150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
300ng/L | 2 号标准品 | 150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
150ng/L | 1 号标准品 | 150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
实验注意事项:
1、手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
2、自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套试剂才能保证检测效果,因为所有试剂都是有关联的,不能混用其他商的产品。只有严格遵守KA&M-BIO试剂盒的说明操作才会得到的检测结果。
4、在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
5、浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
6、刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
7、所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
8、有效期:6个月。
CHL1 Others Human CHL1 / CALL 细胞裂解液 (阳性对照) 酸性罗丹明B,英文名或英文缩写:Lissamine rhodamine B,级别:BS,规格:1克
脑血管周细胞RNAHBVP miRNA5 μg头孢坐林内 Cqfczolin 2923-19-9
PLA2G12B Others Mouse 小鼠 PLA2G12B / PLA2G13 细胞裂解液 (阳性对照) L-MINEL-甲(蛋酸)美国药典级白色至米白色粉末COLDsigma
Kyse510 食管癌细胞2-环己基乙磺酸,英文名或英文缩写:CHES,级别:IND,规格:100克
CL-0394NCI-H2170(肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2Agar,Bacterological 100g 日本分装
HNE2, 鼻咽癌细胞系邻羟甲基本酸内酯,英文名或英文缩写:Phthalide,级别:CP,98%,规格:100克
CA4 Others Human Carbonic Anhydrase IV / CA4 CHO细胞裂解液 (阳性对照) 十二水合流醋铁铵 cmmonium fqrric sulfctq dodqcchydrctq 7783-83-7
胚肾细胞(亚系克隆);FIP293黄递酶,英文名或英文缩写:Diaphorase,级别:BR,5000u/g,根霉,规格:100克
豹猫肌肉成纤维样细胞;LCM4 中国仓鼠体细胞,R 1610细胞 IAR20细胞,大鼠肝细胞组织切片清除剂,英文名或英文缩写:HistoChoice clearing agent,级别:3.5N,规格:100克
胚胎,皮肤,肌肉;M-22Bis-Acrylamide 10g/25g Amresco分装
大额牛皮肤成纤维样细胞;BOS-2四丙基氢氧化铵25%溶液Tetrapropylammonium hydroxide 25% solution质量规格:BR
Caki-1, 肾透明细胞癌皮肤转移细胞毒胡萝卜素(>95% (HPLC),BC)Thapsigargin, from Thapsia garganica质量规格:>95% (HPLC),BC
脑瘤细胞;SF763 大鼠颌下腺上皮细胞*培养基 100mL硫黄素 T(>75%,BS)Thioflavin T质量规格:>75%,BS
食管癌组织源性原代细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)/1ml硫藤黄素(>95%,BC)Thiolutin from Streptomyces luteosporeus质量规格:>95%,BC
GP140 Others HIV 类缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp140 细胞裂解液 (阳性对照) 硫堇(>90%,BS)Thionin质量规格:>90%,BS
环指蛋白180免费代测试剂盒说明WI-38细胞,二倍体细胞系 EBV阳性B瘤细胞,P3HR1细胞 615小鼠树突状细胞肉瘤瘤株;DCS2-十八1酸单甘油酯2-Oleoylglycerol质量规格:美国进口
Bcap-37(癌细胞) 5×106cells/瓶×21-月桂酰-3-氯1-Lauroyl-3-chloropropanediol质量规格:美国进口
CTSL1 Others Human CTSL1 / Cathepsin-L1 细胞裂解液 (阳性对照) 4-丁基苯(>95.0%(GC))4-Butylbenzaldehyde质量规格:>95.0%(GC)
急性T细胞白血病细胞;TALL-1044-苄氧基苯(>98.0%(GC))4-Benzyloxybenzaldehyde质量规格:>98.0%(GC)
RET Others Human RET Kinase 细胞裂解液 (阳性对照) 4-癸氧基苯(>97.0%(GC))4-Decyloxybenzaldehyde质量规格:>97.0%(GC)
使用方法:
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。|
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。