详细介绍
自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
产品仅用于科研储存条件:
14℃或-20℃
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品名称 | 水稻内标准SPS基因染料法qPCR试剂盒 |
英文名称 | Standard qPCR kit for SPS gene in Rice |
货号 | YSP96952 |
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份反应五要素:
产品仅用于科研参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATG随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
Bile saltactivated lipase 胆激活脂肪酶 现货供应 0.2ml ROBININ
Bik 促凋亡Bik蛋白 现货供应 0.1ml Amfebutamone Hydrochloride
phosphoBik(Thr33) 促凋亡Bik蛋白 现货供应 0.1ml (S)Amlodipine
BIRC5/Survivin variant 细胞凋亡抑制因子5 现货供应 0.2ml (S)Amlodipine
BK channel BK通道蛋白 现货供应 0.1ml Tranilast
BMAL1 芳香烃受体核转位蛋白样1 现货供应 0.1ml Tranilast
BKCa channels/KCNMA 钙激活通道蛋白 现货供应 0.1ml CEFADROXIL
BMI1/PCGF4 组蛋白相关Bmi1 现货供应 0.2ml CEFADROXIL
Japanese encephalitis IgM antibody英文简称JEIgM Abβ淀粉样肽 140(C端) 检测范围:685nmol/L
Parkinson disease 2 parkin英文简称Park2芳香基硫酯酶K 检测范围:686nmol/L8ng/mL
Growth arrest specific protein C英文简称GasC醛糖还原酶 检测范围:687nmol/L24ng/mL
Leukocyte Immunoglobulin Like ReHZptor Subfamily A, Member 3英文简称LILRA3血清白蛋白 检测范围:688nmol/L20ng/mL
plagueF1 Antibody英文简称plagueF1 Ab活转录因子4 检测范围:689nmol/L
Endothelin Converting Enzyme英文简称ECEβ抑制蛋白2/β休止蛋白2 检测范围:690nmol/L8ng/mL
leucocyte antigen B27英文简称HLAB27炭疽菌(采用活疫苗制备) 检测范围:691nmol/L240ng/mL
HLAB1502英文简称HLAB1502炭疽杆菌 检测范围:692nmol/L
AntiBRF1 RNA polymerase III Antibody英文简称AntiPol III肾上腺皮质发育异常蛋白 检测范围:693nmol/L16ng/mL
Signal Transducer And Activator Of Transcription 4英文简称STAT4血管紧张素Ⅱ1A型受体 检测范围:694nmol/L1000pg/mL
Hepatitis A virus IgM antibody英文简称HAV IgM AbABI1/SSH3BP1蛋白 检测范围:695nmol/L40mIU/mL
helicobacter pylori antibody英文简称HP Ab酰组蛋白H1b 检测范围:696nmol/L3200ng/ml
YFVAg英文简称YFVAg酰tRNA合成酶2 检测范围:697nmol/L
TFAR19英文简称TFAR19丝抑制蛋白激酶C底物 检测范围:698nmol/L8ng/ml
antimous antibody英文简称HAMA核突触蛋白α 检测范围:699nmol/L800ng/ml
水稻内标准SPS基因染料法qPCR试剂盒肝细胞粘附分子2抗体 英文缩写:HoxC13
氨基己糖苷酶D抗体 英文缩写:HOXC4
HHLA2蛋白抗体 英文缩写:HOXC5
羟脯氨酸抗体 英文缩写:HOXC6
热休克蛋白10抗体 英文缩写:HOXc8
同源盒蛋白PRH抗体 英文缩写:HOXC9
羟类固醇脱氢酶17β抗体 英文缩写:HOXD10
疱疹病毒相关泛素特异性蛋白酶7抗体 英文缩写:HOXD13
同源异型盒基因HOXA5蛋白抗体 英文缩写:HOXD8
异染色质蛋白1-α(HP1α)抗体 英文缩写:HOXD9