详细介绍
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
产品名称 | 转基因构建OTP增强子-CrylA基因PCR试剂盒 |
英文名称 | Construction of OTP enhancer cryla gene PCR kit by transgenic |
货号 | YSP97009 |
自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATG随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
产品仅用于科研引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
EFNA5 Others Mouse 小鼠 EFNA5 / Ephrin-A5 人细胞裂解液 (阳性对照)
人气管上皮细胞RNAHTEpiC miRNA5 μg
狗间叶干细胞(脂肪)(5×105)
615小鼠树突状细胞肉瘤瘤株;DCS 小鼠软骨细胞*培养基 100mL
细胞名称 种属
小耳猪肺细胞;SEP-L2
phospho-ATP citrate lyase(Ser455) 磷酸化三磷酸腺柠檬酸裂解酶标准品规格: 0.1ml
phospho-Ataxin-1(Ser775) 磷酸化失调症蛋白1标准品规格: 0.1ml
AVEN 凋亡、半胱酸蛋白酶激活抑制剂标准品规格: 0.2ml
Kir6.2 ATP敏感性钾通道亚基kir6.2标准品规格: 0.2ml
AVPR2 精氨酸加压素受体2标准品规格: 0.2ml
盐酸尼非卡兰(标准品) 规格:>98.0% Ropinirole HCl
盐酸尼非卡兰 规格:>99%,BR,一水合物 Ropivacaine hydrochloride
盐酸萘替芬(标准品) 规格:>99%,标准品 Ropivacaine hydrochloride
盐酸萘唑啉(标准品) 规格:>99%,BR Rosuvastatin Calcium
盐酸奈福泮(标准品) 规格:HPLC>98%,标准品 Rosuvastatin Calcium
盐酸纳曲酮 规格:≥98.5%,BR,可用于细胞培养 Sitagliptin phosphate monohydrate
盐酸纳洛酮 规格:HPLC>98%,标准品 Sitagliptin phosphate monohydrate
盐酸莫西沙星(标准品) 规格:>95%,BR Spectinomycin Hydrochloride
盐酸莫西沙星 规格:含量测定 Spectinomycin Hydrochloride
盐酸莫索尼定(标准品) 规格:>98.5%,EP6.5 Tamsulosin hydrochloride
转基因构建OTP增强子-CrylA基因PCR试剂盒磷酸化氨基末端激酶1/2/3抗体 英文缩写:IP3
磷酸化蛋白质酪氨酸激酶JAK-1抗体 英文缩写:IP3 receptor
氨基末端激酶2抗体 英文缩写:IPMK
连接介导调节蛋白抗体 英文缩写:IQCA1
氨基末端激酶3抗体 英文缩写:IQCC
磷酸化活化蛋白激酶B抗体 英文缩写:IQCD
JmjC结构域组蛋白去甲基化酶H3-K36抗体 英文缩写:IQCE
组蛋白去甲基化酶JARID2抗体 英文缩写:IQCF1
JAK和微管相互作用蛋白2抗体(JAK和微管相互作用蛋白2) 英文缩写:IQCG
活化蛋白激酶B抗体 英文缩写:IQCJ