详细介绍
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作,必能得出准确的实验结果,可提供免费技术咨询服务!
产品名称:血管内皮生长因子A免费代测试剂盒说明
英文名称:Vascular Endothelial cell Growth Factor A
检测范围:12.5pg/mL~400pg/mL
货号:YS-E988218
保存条件:2-8℃低温保存
保质期:6个月,所有试剂盒均提供批次。
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。
选型:
产品规格:96T/48T
96T指可以做94个标本-2个标准对照-84个样本
48T指可以做47个标本-1个标准对照-42个样本
主要成分:酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属:马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..
试剂盒组成:
1 | 20 倍浓缩洗涤液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1 瓶 | 8 | 标准品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12 孔×8 条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 说明书 | 1 份 |
5 | 显色剂 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 张 |
6 | 显色剂 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 个 |
样本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 号标准品 | 150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
1200ng/L | 4 号标准品 | 150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
600ng/L | 3 号标准品 | 150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
300ng/L | 2 号标准品 | 150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
150ng/L | 1 号标准品 | 150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
实验注意事项:
1、手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
2、自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套试剂才能保证检测效果,因为所有试剂都是有关联的,不能混用其他商的产品。只有严格遵守KA&M-BIO试剂盒的说明操作才会得到的检测结果。
4、在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
5、浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
6、刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
7、所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
8、有效期:6个月。
支气管上皮样细胞;BEAS-2B 卵巢上皮细胞*培养基 100mL乳白蛋白,英文名或英文缩写:α-Lactalbumin,级别:BR,50u/mg,规格:1克
神经束膜细胞RNAHPC miRNA5 μg1,1,2-三录烷 1,1,2-Trichloroqthcnq;Vinyl trichloridq;β-Trichloroqthcnq 79-00-2
ACOX1 Others Human ACOX1 / aox 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 麦芽糖糊精 Mcltodqxtrin 9020-36-6
兔源细胞甲基本基酮,英文名或英文缩写:Acetopxenone,级别:色标,99%,规格:100克
AsPC-1细胞,转移胰腺腺癌细胞 CoC1细胞耐药亚株,CoC1/DDP细胞 非小细胞肺癌细胞;NCI-H232133-40-6L-脯酸盐酸盐metxyl L-prolinate xy7nochloride
肺血管平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)FISHGELATINBLOCKINGBUFFER,10%鱼明胶阻断试剂蛋白组学级琥珀色至浅棕色液体COLDsigma
SDC4 Others Mouse 小鼠 Syndecan-4 / SDC4 细胞裂解液 (阳性对照) β-葡萄糖苷酶 杏仁 (+4℃) BqTc-GLUCOSIDcSq 9001--3
前列腺癌细胞;PC-3 [PC3]吉姆萨染料 Giemsa stain (for use as a blood stain) 51811-82-6 1G 染色剂
293细胞,胚肾细胞 小鼠皮下结缔组织细胞,A9细胞 CL-0242Vero(非洲绿猴肾细胞)5×106cells/瓶×2甜醇,英文名或英文缩写:Dulcitol,级别:高,98%,规格:500毫克
YAC-1(小鼠瘤细胞) 5×106cells/瓶×2L-Threonine 25g/100g/250g/500g/1kg 国产
HUVE-12/CRL2480细胞,脐静脉内皮细胞 长臂猿瘤,MLA-144细胞 内皮细胞总RNAHDLEC NA盐酸头孢他美酯Cefetamet pivoxil 质量规格:≥653µg/mg,BR
QSG-7701(正常肝细胞) 5×106cells/瓶×2盐酸头孢他美酯(标准品)Cefetamet pivoxil 质量规格:效价测定
EL4(小鼠瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0255A875(色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2 豚鼠胚胎细胞;104C1L-生物喋呤L-Biopterin质量规格:>98%,BR
杂交瘤(B类);C3110D2E11渥曼青霉素Wortmannin质量规格:>98%,美国进口,PI3K/AKT通路的抑制剂
MAP2K1 Others Mouse 小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 溴化新斯的明Neostigmine bromide质量规格:>98%
血管内皮生长因子A免费代测试剂盒说明HCT-8/VCR细胞,耐长春新碱结肠癌细胞系 色素瘤细胞,HME6细胞 表达小鼠MHCⅠ类分子Kb的胚肾细胞;293KB杯苋甾酮(标准品)Cyasterone质量规格:HPLC≥98%,标准品
H4(脑神经胶质瘤细胞) 5×106cells/瓶×2四氢小檗碱(标准品)Tetrahydroberberine,THB质量规格:HPLC≥98%,标准品
CD274 Others Human PD-L1 细胞裂解液 (阳性对照) 通关藤苷I(标准品)Tenacissoside I质量规格:HPLC≥98%,标准品
肝脏星形细胞总RNAHHSteC NA通关藤苷G(标准品)Tenacissoside G质量规格:HPLC≥98%,标准品
JAM2 Others Rat 大鼠 JAM-2 / JAM-B 细胞裂解液 (阳性对照) 白花前胡丙素(标准品)Praeruptorin C质量规格:HPLC≥98%,标准品
使用方法:
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。|
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。