详细介绍
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作,必能得出准确的实验结果,可提供免费技术咨询服务!
产品名称:生存素免费代测试剂盒
英文名称:survivin
检测范围:20pg/mL~640pg/mL
货号:YS-E987974
保存条件:2-8℃低温保存
保质期:6个月,所有试剂盒均提供批次。
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。
选型:
产品规格:96T/48T
96T指可以做94个标本-2个标准对照-84个样本
48T指可以做47个标本-1个标准对照-42个样本
主要成分:酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属:马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..
试剂盒组成:
1 | 20 倍浓缩洗涤液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1 瓶 | 8 | 标准品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12 孔×8 条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 说明书 | 1 份 |
5 | 显色剂 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 张 |
6 | 显色剂 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 个 |
样本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 号标准品 | 150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
1200ng/L | 4 号标准品 | 150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
600ng/L | 3 号标准品 | 150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
300ng/L | 2 号标准品 | 150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
150ng/L | 1 号标准品 | 150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
实验注意事项:
1、手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
2、自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套试剂才能保证检测效果,因为所有试剂都是有关联的,不能混用其他商的产品。只有严格遵守KA&M-BIO试剂盒的说明操作才会得到的检测结果。
4、在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
5、浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
6、刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
7、所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
8、有效期:6个月。
大鼠肝细胞瘤;H-4-II-EN-乙酰-D-色酸100克
SFPAC-1细胞,胰腺癌细胞 舌癌细胞系,Tca8113-P60细胞 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-D2α-溴代-γ-丁内酯 2-Bromo-4-butcnolidq 2061-1-
J82(膀胱癌细胞) 5×106cells/瓶×2乙酰辅酶A25克
Promocell C-21070 Small Airway Epithelial CellGrowth Medium, 小呼吸道上皮细胞生长培养基(即用型) 500ml盐酸奈乙二安5克
脑膜细胞裂解物HMCL.6-二甲基2,6-Lutidine
肺粘液上皮样癌细胞;NCI-H292甘油三油酸醋,英文名或英文缩写:Glycerol trioleate,级别:BR,97%,规格:5克
NK-92MI细胞,恶性非霍奇金瘤患者的自然杀伤细胞 表达HBV病毒的肝细胞,HepG2.2.15细胞 CL-0192RBL-2H3(大鼠嗜碱性细胞白血病细胞)5×106cells/瓶×2流醋本安 cnilinq sulfctq 24-16-2
叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21CASPASE-3INHIBITORVIICASPASE-3 抑制剂 VII试剂级米白色固体COLDsigma
KIRREL Others Mouse 小鼠 KIRREL1 / NEPH1 细胞裂解液 (阳性对照) 2,9-二甲基邻啰啉,英文名或英文缩写:Neocuproine,级别:CP,99%,规格:50克
角腊上皮细胞生长添加物CEpiCGS(蛋白酶抑制剂)
IL12B Others Human IL12B / P40 细胞裂解液 (阳性对照) 正十五烷(标准品)N-PENTADECANE质量规格:内标
猪细胞;ST咖啡酸乙酯(标准品)ETHYL CAFFEATE质量规格:含量测定
VEGFC Others Rat 大鼠 VEGFC / VEGF-C (aa 108-223) 细胞裂解液 (阳性对照) 柠檬酸无水Citric acid质量规格:>99%,AR
气管平滑肌细胞*培养基 100mL柠檬酸无水(标准品)Citric acid质量规格:含量测定
OCM-1A细胞,低侵袭性脉络膜色素素瘤细胞 绿色木霉 小鼠树突状细胞肉瘤细胞;DCS硫酸钾(标准品)Potassium sulfate 质量规格:含量测定
生存素免费代测试剂盒CLU Others Human CLU / Clusterin 细胞裂解液 (阳性对照) 氘代盐酸(50g)Deuterium Chloride质量规格:D, 99.5% DCL 35% IN D2O
成纤维细胞RNAHLF miRNA5 μg1酸-d3(100g )Phosphoric Acid-D3 (D, 99%)质量规格:D,99%
F13B Others Human F13B / Coagulation factor XIII B chain 细胞裂解液 (阳性对照) 氘代苯-D6(0.6ml x 10 )Benzene-D6质量规格:D,99.5%+0.05%TMS
U251 神经胶质瘤细胞氘代苯-D6(0.5ml x 10 )Benzene-D6质量规格:D,99.5%
CL-0426RKO-E6(结肠癌转基因细胞)5×106cells/瓶×2氘代苯-D6(0.55ml x 10)Benzene-D6质量规格:D,99.5%+0.03%TMS
使用方法:
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。|
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。