详细介绍
产品属性:
产品名称:黄杆菌通用PCR检测试剂盒
英文名称:Flavobacterium spp.PCR
规格:50T
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3.细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix(2mM)4 μl
引物1(10pM)2 μl
引物2(10pM)2 μl Taq
酶 (2U/μl)1 μl DNA
模板(50ng-1μg/μl)1 μl
加ddH2O至 50 μl
实验过程:
一、试剂准备 | 二、操作步骤 |
1. DNA模板 2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl引物2(10PM) 2μlTaq 酶(2U/μl) 1μl DNA 模板(50ng-1μg/μl) 1 μl加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 |
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
Phospho-Smad2(Thr220): 0酸化细胞信号转导分子SMAD2抗体 0.1ml
Phospho-Ezrin (Thr567): 0酸化埃兹蛋白抗体 0.1ml
细胞粘合素抗体 Anti-Tenascin/TN 0.1ml
Anti-TLR1/FITC 荧光素标记Toll样受体1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-LEO1(Ser551) 0酸化RNA聚合酶相关蛋白LEO1抗体 规格 0.1ml
Bcl-xL(human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse) Bcl-xL蛋白抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
小鼠信号转导分子1(Smad1)ELISA试剂盒 ,英文名: Smad1 ELISA Kit
小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)ELISA检测试剂盒MousehepatitisBviruseaigen,HBeAgELISAKit 96T/48T
人环0酸鸟苷(cGMP)免疫试剂盒 Human Cyclic guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit
ratCoicosterone,COELISAKit大鼠皮质同/肾上腺同(CO)ELISA试剂盒规格:96T/48T
2%戊二固着液(Glaraldehyde)50毫升
MouseCTX-2ELISA试剂盒小鼠骨退化特异标志物(CTX-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
黄杆菌通用PCR检测试剂盒phospho-NFKB p65 (pSer536) peptide 0酸化细胞核因子/0酸化k基因结合核因子抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-APOD 载脂蛋白D抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ATXN1(Thr236) 0酸化失调症蛋白1抗体 规格 0.1ml
山羊抗兔 IgG(H+L)/Biotin 0.1ml 美国Jackson公司分装
VEGF-A 英文名称: 血管内皮生长因子A 0.1ml
DNA polymerase delta 英文名称: DNA聚合酶γ抗体 0.2ml
Anti-APOD 载脂蛋白D抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。