详细介绍
组织来源:骨髓
产品规格:5×10^5cells/T25细胞培养瓶
细胞简介:
兔肺成纤维细胞分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓基质系统内存在的骨髓间充质干细胞是一种除造血干细胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞,可以向骨、软骨、肌组织、皮肤、脂肪、神经等多种组织分化,因此可以作为组织工程中的种子细胞。在骨髓中,BMSC占骨髓有核细胞总数的0.001%-0.1%,含量极低。骨髓间充质干细胞的体外培养条件要求较高,在培养过程中,受贴壁时间、种植密度、血清含量、培养温度和培养基pH值等条件的影响。
本公司生产的兔骨髓间充质干细胞采用冲洗骨髓、密度梯度离心、差速贴壁法结合培养基筛选制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;细胞经CD90/CD44、CD34/CD45免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息:
DMEM-F12、FBS、间充质干细胞生长添加剂、Glutamine、Penicillin、Streptomycin等
我们推荐使用Procell兔骨髓间充质干细胞*培养基(产品货号:CM-Rb007)作为体外培养兔骨髓间充质干细胞的培养基。
收到兔肺成纤维细胞后,检查外包装是否完整,细胞培养瓶是否完好。如有破损漏液等问题,请即时联系。并进行以下操作:
1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。
2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理,以稳定细胞状态。
3. 预热*培养基(含1%双抗)。
4. 显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(40×,100×,200×各一张)。
5. ①若细胞密度较小,无菌操作,去掉培养基。每瓶添加第四步中准备的5-6ml培养基。放到37度培养箱培养。待细胞密度达到80%以上,进行传代。
②若细胞密度较大,达到80%以上,将细胞传代培养。
注:
培养瓶里的培养基血清浓度为5%,建议更换成自己配好的新鲜培养基。由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,这时请在拍照后将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的*培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的*培养基。(这里是针对原来*培养基FBS浓度是10%的情况,如果原来FBS浓度是20%,可以增加到25%FBS浓度) 收到细胞后如细胞状态不佳或培养中遇到问题,请当天反馈并提供图片,且保存前三天照片以便分析。7天内反馈,细胞本身问题免费重发如人为原因导致可根据实际情况酌情处理;7天内未接到任何反馈视为合格,不予免费售后。
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