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人脉络膜血管内皮细胞培养方法
阅读:205 发布时间:2018-7-2人脉络膜血管内皮细胞培养方法
一、产品简介
1. 产品名称:人脉络膜血管内皮细胞
2. 组织来源:脉络膜组织
3. 产品规格:5×105cells/T25 细胞培养瓶
4. 细胞简介:
人脉络膜血管内皮细胞培养方法人脉络膜血管内皮细胞分离自眼球脉络膜组织;脉络膜在视网膜和巩膜之
间,含有丰富血管和色素细胞,对外力冲击的耐受性较视网膜差,当眼球受到从
前面来的外力的冲击作用通过玻璃体传到后极部时,坚硬的巩膜在其外面又有抵
抗作用,使脉络膜在内外两种作用夹攻下而发生破裂和出血。脉络膜呈暗褐色,
围绕视神经乳头部有照膜,为青绿色带金属光泽的三角形区。脉络膜是眼球中膜
的后2/3 处的薄膜,由纤维组织、小血管和毛细血管组成,软而薄,棕红色,在
巩膜和视网膜之间,续连于睫状体后方。脉络膜的血循环营养视网膜外层,其含
有的丰富色素起遮光暗房作用。主要功能是营养视网膜外层及玻璃体,并有遮光
作用,使反射的物象清楚。同时对视觉系统起保护作用,对整个视觉神经有调节
作用。续连于睫状体后方,含丰富的血管和色素细胞,有营养和遮光作用。
本公司生产的脉络膜血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法并通过
内皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶;细胞经
CD31/vWF 免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支
原体、细菌、酵母和真菌等。
5. 培养基信息:
M199、FBS、内皮细胞生长添加剂、Heparin、Ascorbic Acid、Hydrocortisone、
Penicillin、Streptomycin 等
二、细胞培养状态发货时发送
细胞电子版照片
人脉络膜血管内皮细胞培养方法三、使用方法
在技术部标准操作流程下,人脉络膜血管内皮细胞可传3-5 代;建议您收到细胞
后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25 细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱
和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出T25 细胞培养瓶中的培养基,用PBS 清洗细胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL 至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个
培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观
察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml *培养基终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2-1:3 适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完
全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4) 待细胞*贴壁后,培养观察;之后每隔2-3 天更换新鲜的*培养基。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6 个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3 天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和
技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我
们,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得
到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考