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厌氧培养箱的注意事项

阅读:71      发布时间:2025-04-08
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厌氧培养箱的注意事项

厌氧培养箱是一种在无氧环境条件下进行细菌培养及操作的实验装置。它能提供严格的厌氧状态恒定的温度培养条件和具有一个系统化、科学化的工作区域。在厌氧培养箱内操作培养,可以培养难生长的厌氧生物,又能避免以往厌氧生物在大气中操作时接触氧而死亡的危险性,因此本装置是厌氧生物检测科研的理想工具。本装置也是一物多用的良好仪器,如改变操作方式,为微需氧菌的生长繁殖提供良好的生长条件,可采用内置.含氧检测仪(用于自配),通过检测及需要并配于操作面板的流量调节装置。输入微需氧菌的规定含氧量,可满足微需氧菌的生长繁殖提供良好的生长条件。

 

1.仪器尽可能地安装于空气清净、温度变化较小的地方;

2.开机前应全面熟悉和了解各组成配套仪器、仪表的使用说明,掌握正确使用方法;

3.培养物放入必须是在操作室内达到厌氧环境后放入;

4.如发生故障(停气等原因)操作室内仍可保持10小时厌氧状态(超过10小时则根据需要把培养物取出另作处理);

5.经常注意气路有无漏气现象;

6.调换气瓶时,注意要扎紧气管,避免流入含氧气体;

真空泵按要求使用,定期检查加油。

 

一、操作室厌氧环境形成

1 按使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室内放入二个无毒塑料袋。

2 通电源开照明灯,开控温仪,调节所需温度及安全温度。

3 操作室内放入1000g钯粒(封闭)和500g干燥剂,并放入美兰指示剂(封闭)。

4 关紧取样室内外门,并抽真空校验。

5 操作室内DI一次置换(氮气置换):

1)先用橡皮管插入操作室内进气口,另一头插入塑料袋。

2)接通氮气进气路,打开氮气控制阀,使二只塑料袋充足氮气,然后扎紧袋口。

3)把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧。

4)把塑料袋内氮气渐渐地放于操作室内,至全部放出。

6 操作室DI二次置换(氮气置换)重复一 次充氮过程,并注意随时用脚踏开关开闭排气。

7 操作室DI三次置换(混合气体置换):

(混合气体配比为:N2↑ 85% H2 ↑ 10% CO2↑ 5%)

1)调换气路打开混合气道通阀门进气,充气时要随时脚踏开关开闭排气。

2)混合气充满塑料袋后,关掉混合气直通阀(三通阀),使混合气经过流量计输入操作并调整流量计,流量为每分钟10毫升左右。

3)把塑料袋内混合气渐渐排于操作室内。

4)通过三次换气后,操作室内气体含氧量已处于极微量状态。

8 操作室内打开钯粒除氧剂,接通除氧催化器电源进行催化除氧,一 小时后打开美兰指示剂(美兰安瓶)观察其变况,不变色为操作室内达到厌氧环境。

9 开紫外线灭菌灯,室内进行灭菌处理。灭菌时间自定。

 

二、菌种的置入和培养

1 检查取样室内门并关紧之。

2 打开取样室外门,将菌种放入取样室后即关上外门。

3 取样室充氮置换三次过程:先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停,然后人工打开氮气阀门进气,使指针回复零位后进行下次操作。

4 如选定真空度较低就需要增加置换的次数。

5 取样室内外门开启,关紧要抽低真空度100毫米汞柱(13 Kpa)检验及帮助操作。

6 厌氧培养箱需要长期连续使用的条件:

1)每天在操作室内打开美兰指示剂观察,正常情况下使用。如不正常就必须重新换气。

2)要长期连续输入微量的混合气体,使补进的氢气能和微量的氧结合通过催化吸收,保证了室内厌氧状态,补入混合气流量选定为每分钟10毫升左右。

3)连续培养运行一 天,更换一 次除氧剂和干燥剂。

7 接种棒灭菌器的应用:

1)随时用镍铬电热丝使电极短路而变赤热以进行杀菌(接种棒)

2)熔蜡处可直接放上,试管封蜡口旋转熔蜡。

8 操作室里的培养箱内的温度可任意选择和控制。

9 混合气瓶、氮气瓶输出压力调整:调节减压阀,使输出压力为0.1Mpa左右。

 


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