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流感病毒是一种包膜病毒,主要根据内部核蛋白(NP)的保守性抗原差异分为甲型(A)、乙型(B)和丙型(C)三种类型。其中,只有甲型和乙型流感病毒对人类具有临床相关性。甲型流感病毒比乙型流感病毒更为常见,与大多数严重的流感流行密切相关。此外,甲型流感病毒还可根据外部血凝素蛋白(H1-H16)和神经氨酸酶蛋白(N1-N9)的抗原差异进一步细分为不同的毒株或亚型。
核蛋白(NP)的主要功能是包裹分段的RNA基因组,并与三种聚合酶亚基(PA、PB1和PB2)结合,形成核糖核蛋白复合体(RNPs),从而实现RNA的转录、复制和包装。
Cell Biolabs的流感A型核蛋白ELISA试剂盒是一种用于检测和定量流感A型核蛋白的酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒。该试剂盒的抗体仅能识别流感A型的核蛋白,不会与流感B型或C型的核蛋白发生交叉反应。试剂盒的检测灵敏度为625皮克/毫升流感A型核蛋白。每套试剂盒提供的试剂足以进行最多96次检测,包括标准曲线和流感A型裂解样本。
作为Cell Biolabs全国总代理,艾美捷科技强烈推荐Cell Biolabs热销产品甲型流感核蛋白ELISA试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
甲型流感核蛋白ELISA试剂盒 | VPK-5174 | 查看 |
甲型流感核蛋白ELISA试剂盒检测原理:
将抗流感A型核蛋白单克隆抗体吸附在微量滴定板上。样本或标准品中的流感A型核蛋白会与吸附在板上的抗体结合;随后加入FITC标记的抗流感A型核蛋白单克隆抗体,与被第一抗体捕获的流感A型核蛋白结合。经过孵育和洗涤步骤后,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗FITC单克隆抗体,与FITC标记的抗流感A型核蛋白单克隆抗体结合。在洗涤步骤中去除未结合的HRP标记的抗FITC抗体,然后向孔中加入与HRP反应的底物溶液。根据样本中流感A型核蛋白的含量,会形成相应比例的有色产物。通过加入终止液终止反应,并在450纳米处测量吸光度。使用提供的重组流感A型核蛋白标准品制备标准曲线,从而确定样本中流感A型核蛋白的浓度。
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试剂盒组成
盒子1(常温运输)
1. 抗流感A型核蛋白抗体包被板(部件号51741B):一条96孔板。
2. FITC标记抗流感A型核蛋白单克隆抗体(部件号51742C):一瓶20微升。
3. 辣根过氧化物酶标记抗FITC单克隆抗体(部件号310811):一瓶20微升。
4. 检测稀释液(部件号310804):一瓶50毫升。
5. 10倍病毒裂解缓冲液(部件号51693B):一瓶15毫升,含有200 mM Tris,pH 7.5,1500 mM NaCl,10% Triton X-100,1% SDS。
6. 10倍洗涤缓冲液(部件号310806):一瓶100毫升。
7. 底物溶液(部件号310807):一瓶12毫升,琥珀色瓶。
8. 终止液(部件号310808):一瓶12毫升。
盒子2(蓝冰运输)
1. 重组流感A型核蛋白标准品(部件号51743D):一瓶100微升,4微克/毫升重组人流感B型核蛋白(Met1-Tyr560),含有BSA的PBS溶液。
未提供材料
1. 流感A型样本:纯化病毒或未纯化的病毒上清液
2. 微量离心机
3. 10微升至1000微升可调节单通道微量移液器及一次性吸头
4. 50微升至300微升可调节多通道微量移液器及一次性吸头
5. 多通道微量移液器储液槽
6. 能在450纳米处读数的微孔板读数仪(620纳米为可选参考波长)
保存方法
收到试剂盒后,将流感A型核蛋白标准品分装并保存在-20℃,避免反复冻融。其他所有组分保存在4℃。
结果示例
以下图表展示了典型的流感A型核蛋白ELISA检测结果。以下数据仅供参考,不应用于解释实际结果。
文献参考:
1. Eisfeld AJ, Neumann G, Kawaoka Y. (2015) At the centre: influenza A virus ribonucleoproteins. Nat Rev Micro. 13, 28–41.
2. Compans RW, Content J, Duesberg PH. (1972) Structure of the Ribonucleoprotein of Influenza Virus. J Virol. 10, 795–800.
3. Martin K, Helenius A. (1991) Transport of incoming influenza virus nucleocapsids into the nucleus. J Virol. 65, 232–244.
4. O’Neill RE, Jaskunas R, Blobel G, Palese P, Moroianu J. (1995) Nuclear import of influenza virus RNA can be mediated by viral nucleoprotein and transport factors required for protein import. J Biol Chem. 270, 22701–22704.
5. Avalos RT, Yu Z, Nayak DP. (1997) Association of influenza virus NP and M1 proteins with cellular cytoskeletal elements in influenza virus-infected cells. J Virol. 71, 2947–2958.
6. Digard P, Elton D, Bishop K, Medcalf E, Weeds A, Pope B. (1999) Modulation of nuclear localization of the influenza virus nucleoprotein through interaction with actin filaments. J Virol. 73, 2222–2231.
Cell Biolabs公司位于美国加利福尼亚州南部重要的工业城市圣迭戈(San Diego),是有名的细胞学试剂品牌,作为前沿的细胞学分析检测试剂盒生产商,为生物技术和研究类客户提供好的基于细胞功能研究以及疾病等方面的g端产品和技术服务。产品主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。全球众多大学、政府研究机构、生物、制药企业的科研实验室均在使用Cell Biolabs的产品。
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