甲型流感免疫空斑检测试剂盒 返回列表页

流感病毒是一种包膜病毒，主要根据内部核蛋白（NP）的保守性抗原差异分为甲型（A）、乙型（B）和丙型（C）三种类型。其中，只有甲型和乙型流感病毒对人类具有临床相关性。

在细胞单层中进行的噬斑测定是定量检测感染性病毒和抗病毒物质的常用方法。在这些测定中，每个感染性病毒颗粒在特定条件下繁殖，形成一个局部感染细胞区域，称为噬斑。噬斑表现为死亡或破坏的细胞区域，可通过通用细胞染色检测到。

Cell Biolabs的流感A型免疫噬斑测定试剂盒提供了一个准确的系统，用于测定病毒的感染性滴度。与传统的噬斑测定不同，该试剂盒使用特异性的抗流感A型核蛋白抗体进行免疫染色，以揭示感染细胞区域的噬斑。试剂盒提供的试剂足以在12孔板中进行最多60次滴定实验。

作为Cell Biolabs全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Cell Biolabs热销产品甲型流感免疫空斑检测试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

甲型流感免疫空斑检测试剂盒检测原理：

第一天：在12孔或6孔板中接种MDCK细胞  

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第二天：用流感病毒系列稀释液感染MDCK细胞，并添加覆盖培养基  

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第五天：用抗流感病毒核蛋白抗体进行染色  

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计数阳性噬斑并计算病毒滴度  

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试剂盒组成（常温运输）

1. 5倍DMEM培养基（部件号51901B）：一瓶30毫升无菌瓶，含有5倍DMEM、碳酸氢钠、非必需氨基酸和5毫克/毫升BSA。  

2. CytoSelect?琼脂粉（部件号113001）：一瓶1.2克。  

3. TPCK-胰蛋白酶（100倍）（部件号51902C）：一瓶1毫升无菌管，含有100微克/毫升TPCK-胰蛋白酶，1毫克/毫升BSA。  

4. 抗流感A型核蛋白抗体（1000倍）（部件号51891C）：一瓶30微升。  

5. 辣根过氧化物酶标记二抗（1000倍）（部件号10902）：一瓶50微升。  

6. DAB底物（25倍）（部件号10903）：一瓶1.5毫升。  

7. 稀释液（10倍）（部件号10905）：一瓶4.5毫升。  

未提供材料

1. 流感A型病毒样本  

2. MDCK细胞、细胞培养生长培养基和无菌DPBS  

3. 无菌细胞培养级水  

4. 微波炉或加热块  

5. 水浴锅  

6. 10%中性缓冲甲醛  

7. 0.1% Triton X-100的PBS溶液  

8. 1% BSA/PBS溶液  

9. H?O?  

10. 显微镜  

保存方法

收到试剂盒后，将TPCK-胰蛋白酶、抗流感A型核蛋白抗体和二抗保存在-20℃。其他所有试剂盒组分保存在4℃。

结果示例

以下图表展示了典型的滴定结果。以下数据仅供参考，不应用于解释实际结果。

图1：流感A型病毒感染MDCK细胞的噬斑形成  

流感A型病毒用于感染MDCK细胞24至72小时。感染后24小时、48小时和72小时，按照检测协议进行抗流感A型核蛋白免疫染色。

文献参考：

1. Herz C, Stavnezer E, Krug R, Gurney T. (1981) Influenza virus, an RNA virus, synthesizes its messenger RNA in the nucleus of infected cells. Cell 26, 391–400.

2. Jackson DA, Caton AJ, McCready SJ, Cook PR. (1982) Influenza virus RNA is synthesized at fixed sites in the nucleus. Nature 296, 366–368.

3. Baer, A. & Kehn-Hall, K. (2014) Viral concentration determination through plaque assays: using traditional and novel overlay systems. J. Vis. Exp. 93, 52065

Cell Biolabs公司位于美国加利福尼亚州南部重要的工业城市圣迭戈（San Diego），是有名的细胞学试剂品牌，作为前沿的细胞学分析检测试剂盒生产商，为生物技术和研究类客户提供好的基于细胞功能研究以及疾病等方面的g端产品和技术服务。产品主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。全球众多大学、政府研究机构、生物、制药企业的科研实验室均在使用Cell Biolabs的产品。  

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