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磷酸肌醇(PA)是细胞中许多脂质生物合成的关键前体。PA在细胞膜结构中发挥着关键作用,并作为一种信号脂质,将细胞质中的蛋白质招募到细胞膜上。在细胞内,PA的浓度通过强效磷脂磷酸酶的活性维持在极低水平,这些酶将磷酸肌醇转化为二酰基甘油(DAG)。由于DAG也是一种重要的脂质前体,它也会迅速代谢为其他膜脂质成分(例如,磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺)。最终,测量细胞中的PA对于监测脂质的合成和代谢是非常有用的。
Cell Biolabs的总磷酸肌醇测定试剂盒通过耦联酶反应系统测量样本中的总磷酸肌醇含量,包括溶血磷酸肌醇(LPA)。首先,使用脂肪酶将样本中的磷酸肌醇水解为甘油-3-磷酸。接下来,甘油-3-磷酸在甘油-3-磷酸氧化酶(GPO)的作用下被氧化,产生过氧化氢,过氧化氢与试剂盒中的荧光探针(激发波长530-560 nm/发射波长585-59 nm5)发生反应。
总磷酸肌醇测定试剂盒是一种简单的荧光法测定方法,采用96孔微孔板格式定量测量样本中的总PA(PA和LPA)。每套试剂盒提供的试剂足以进行多达100次测定,包括空白、标准品和未知样本。试剂盒包含L-α-磷酸肌醇标准品,检测灵敏度限约为5 ?M。
注意: 本试剂盒不适用于尿液、血浆或血清样本。
作为Cell Biolabs全国总代理,艾美捷科技强烈推荐Cell Biolabs热销产品总磷脂酸检测试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
总磷脂酸检测试剂盒 | MET-5019 | 查看 |
试剂盒组成:
磷酸肌醇标准品(部件号50191D):一瓶200 ?L的1 mM L-α-磷酸肌醇。
10X测定缓冲液(部件号50192D):一瓶1.5 mL。
脂肪酶溶液(部件号50193D):三瓶1.4 mL。
酶混合液(部件号50194D):三瓶1.75 mL。
荧光探针(部件号261901):一瓶110 ?L的琥珀色瓶。
未提供材料:
标准96孔荧光黑色微孔板
含镁和钙的PBS
细胞脂质提取试剂(甲醇、氯仿、1M氯化钠)
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储存:
将整个试剂盒储存于-80℃。通过分装避免多次冻融。荧光探针对光敏感,应保存在琥珀色试管中。
Cell Biolabs公司位于美国加利福尼亚州南部重要的工业城市圣迭戈(San Diego),是有名的细胞学试剂品牌,作为前沿的细胞学分析检测试剂盒生产商,为生物技术和研究类客户提供好的基于细胞功能研究以及疾病等方面的g端产品和技术服务。产品主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。全球众多大学、政府研究机构、生物、制药企业的科研实验室均在使用Cell Biolabs的产品。
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