DAG(二酰基甘油)检测试剂盒 返回列表页

二酰基甘油（DAG）是许多细胞脂质生物合成的关键中间体，在生化信号传导中发挥着基础性作用。

从结构上看，二酰基甘油是一种甘油酯，由2条脂肪酸链通过中心的甘油骨架连接而成。二酰基甘油是许多脂质（例如，甘油三酯、磷脂）的前体；然而，DAG还作为一种第二信使信号脂质发挥作用，它是通过磷脂酶C水解PIP?产生的，能够引发细胞内Ca??的释放和蛋白激酶C（PKC）的激活。最终，PKC酶参与了许多对正常细胞生理的修饰，影响了数百种底物。

Cell Biolabs的DAG检测试剂盒通过耦联酶反应系统测量样本中的二酰基甘油含量。

首先，使用激酶对DAG样本进行磷酸化，生成磷酸肌醇。接下来，使用脂肪酶将磷酸肌醇水解为甘油-3-磷酸。最后，甘油-3-磷酸在甘油-3-磷酸氧化酶（GPO）的作用下被氧化，产生过氧化氢，过氧化氢与试剂盒中的荧光探针（激发波长530-560 nm/发射波长585-595 nm）发生反应。

DAG检测试剂盒是一种简单的荧光法测定方法，采用96孔微孔板格式定量测量细胞裂解液中的总DAG（二酰基甘油）。

每套试剂盒提供的试剂足以进行多达100次测定，包括空白、标准品和未知样本。试剂盒包含DAG标准品，检测灵敏度限约为15 ?M。

*注意：每个样本重复需要2次测定，一次加入激酶混合液（+Kin），一次不加（-Kin）。DAG的含量通过两个孔的荧光读数差异计算得出。

作为Cell Biolabs全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Cell Biolabs热销产品DAG(二酰基甘油)检测试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

DAG(二酰基甘油)检测试剂盒组成（干冰运输）：

DAG标准品（部件号50281D）：一瓶1 mL的2 mM 1,2-二油酰-sn-甘油。

10X测定缓冲液（部件号50192D）：一瓶1.5 mL。

激酶混合液（部件号50282D）：两瓶1 mL，含有ATP。

脂肪酶溶液（部件号50193D）：三瓶1.4 mL。

酶混合液（部件号50194D）：三瓶1.75 mL。

荧光探针（部件号261901）：一瓶110 ?L的琥珀色瓶。

未提供材料：

标准96孔荧光黑色微孔板

含镁和钙的PBS

细胞脂质提取试剂（甲醇、氯仿、1M氯化钠）

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储存：

将整个试剂盒储存于-80℃。通过分装避免多次冻融。荧光探针对光敏感，应保存在琥珀色试管中。

文献参考：

1. Yang, C. and Kazanietz, M.G. (2003) Trends Pharmacol. Sci. 24, 602-608.

2. Brose, N. et al. (2004) Curr. Opin. Neurobiol. 14, 328-340.

3. Athenstaedt, K. and Daum, G. (1999) Eur. J. Biochem. 266, 1-16.

4. Kanoh, H. et al. (2002). J. Biochem. (Tokyo) 131, 629-633.

5. Corbalan-Garcia, S. and Gomez-Fernandez, J.C. (2006) Biochim. Biophys. Acta 1761, 633-654

6. Wang, Q.J. (2006). Trends Pharmacol. Sci. 27, 317-323.

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