黄嘌呤 检测试剂盒 返回列表页

鸟苷是一种嘌呤核苷，由鸟嘌呤基团通过β-N9-糖苷键连接到核糖环上组成。

鸟苷可以通过磷酸化过程转化为鸟苷酸单磷酸（GMP）、环鸟苷酸单磷酸（cGMP）、鸟苷酸二磷酸（GDP）和鸟苷酸三磷酸（GTP）。这些磷酸化的鸟苷形式在核酸和蛋白质合成、光合作用、肌肉收缩以及细胞内信号转导（特别是与cGMP相关）等过程中发挥关键作用。

鸟苷在mRNA中是RNA剪接反应所必需的。

当一个“自剪接"内含子从mRNA信息中切除自身时（需要一个5'鸟苷），它会在两端切割、重新连接，并仅留下两侧的外显子以翻译成功能性蛋白。抗病d药物阿昔洛韦（用于治疗疱疹）和抗HIV药物阿巴卡韦都与鸟苷在结构上相似。鸟苷还被用于合成雷加诺生，这是一种A2A腺苷受体激动剂，作为冠状动脉舒张剂，常用于药物负荷试验。鸟苷在预防由犬尿氨酸（QA）诱导的癫痫发作方面与NMDA受体拮抗剂MK-801的效果相当。除了作为NMDA受体激动剂外，QA还会减少谷氨酸的运输/摄取。研究表明，鸟苷可以抵消QA诱导的谷氨酸摄取减少，并增加突触中谷氨酸的释放。

Cell Biolabs的鸟苷检测试剂盒是一种简单的荧光法测定方法，可在96孔微孔板格式中测量生物样本中的总鸟苷含量。

每套试剂盒提供的试剂足以进行多达100次测定，包括空白、鸟苷标准品和未知样本。样本中的鸟苷浓度通过与已知浓度的鸟苷标准品进行比较来确定。试剂盒的检测灵敏度限为1.6 ?M鸟苷。

*注意：每个样本重复需要2次测定，一次加入嘌呤核苷磷酸化酶（+PNP），一次不加（-PNP）。鸟苷的含量通过两个孔的相对荧光单位（RFU）读数差异计算得出。

作为Cell Biolabs全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Cell Biolabs热销产品黄嘌呤/次黄嘌呤检测试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

黄嘌呤/次黄嘌呤检测试剂盒检测原理：

Cell Biolabs的鸟苷检测试剂盒用于测量生物样本中的总鸟苷含量。鸟苷在嘌呤核苷磷酸化酶（PNP）的作用下转化为鸟嘌呤，随后鸟嘌呤在鸟嘌呤脱氨酶的作用下转化为黄嘌呤，黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶的作用下转化为尿酸和过氧化氢。生成的过氧化氢通过一种高特异性的荧光探针进行检测。辣根过氧化物酶催化探针与过氧化氢之间的反应，两者以1:1的比例结合。样本与已知浓度的鸟苷标准品在96孔微孔板格式中进行比较。样本和标准品在孵育15分钟后，使用标准96孔荧光板读取器进行读取（见图1）。

图1. 鸟苷检测原理。

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MET-5148：鸟嘌呤检测试剂盒（荧光法）

MET-5090：腺苷检测试剂盒

MET-5092：肌苷检测试剂盒

试剂盒组成（蓝冰运输）

鸟苷标准品（部件号51491C）：一支50 ?L的100 mM溶液。

10X测定缓冲液（部件号268002）：一瓶25 mL的500 mM磷酸钠缓冲液，pH 7.4。

荧光探针（部件号50231C）：一支50 ?L的DMSO溶液。

辣根过氧化物酶（HRP，部件号234402-T）：一支10 ?L的100 U/mL溶液，溶于甘油中。

50X鸟嘌呤脱氨酶（部件号51472D）：一支100 ?L管。

嘌呤核苷磷酸化酶（部件号50903D）：一支500 ?L的18.9 U/mL溶液。

*注：酶的单位定义为在pH 7.4、25℃条件下，每分钟使1.0 ?mol肌苷发生磷酸解离生成次黄嘌呤和核糖1-磷酸的酶量。

黄嘌呤氧化酶（部件号50904D）：一支100 ?L的2.5 U/mL溶液。

*注：酶的单位定义为在pH 7.5、25℃条件下，每分钟将1.0 ?mol黄嘌呤转化为尿酸的酶量。使用次黄嘌呤作为底物时，可获得约50%的活性。

未提供材料

磷酸盐缓冲液（PBS）

标准96孔黑色荧光微孔板和/或黑色细胞培养微孔板

储存

收到试剂盒后，将10X测定缓冲液置于室温保存，其余组分保存于-20℃。荧光探针对光敏感，需妥善保存。避免多次冻融循环。

*注：s次解冻50X鸟嘌呤脱氨酶、嘌呤核苷磷酸化酶或黄嘌呤氧化酶后，建议分装成小份量并保存于-20℃。

Cell Biolabs公司位于美国加利福尼亚州南部重要的工业城市圣迭戈（San Diego），是有名的细胞学试剂品牌，作为前沿的细胞学分析检测试剂盒生产商，为生物技术和研究类客户提供好的基于细胞功能研究以及疾病等方面的g端产品和技术服务。产品主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。全球众多大学、政府研究机构、生物、制药企业的科研实验室均在使用Cell Biolabs的产品。  

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