VitroGel STEM(生化试剂) 返回列表页

干细胞静态悬浮培养方案:

VitroGel STEM 是一种无异种蛋白的水凝胶系统，用于提高三维（3D）培养的性能和扩大人类多能干细胞（hPSCs）群体的规模，以创建一个高通量系统来模拟各种组织和疾病状态。VitroGel STEM 是即用型的，具有优化的配方，w全支持快速扩展具有多能性的高质量3D干细胞球体。水凝胶系统可以通过不同的培养方法支持3D细胞生长，如3D水凝胶包埋、2D厚水凝胶涂层、水凝胶-细胞珠和静态悬浮培养。

在本协议中，我们将重点介绍使用VitroGel STEM进行干细胞球体扩增和规模化生产时的静态悬浮培养方法。从液氮中直接解冻的hPSCs或从2D基质涂层培养容器中传代的hPSCs可以立即与水凝胶溶液混合进行静态悬浮培养。此外，优化的协议非常适合时间敏感的实验，因为它不需要频繁的培养基更换，这最终可以节省时间和材料。VitroGel STEM与大多数hPSC培养基和组织培养容器兼容。由于d特的静态悬浮培养协议方法，在大规模生物反应器中使用时不需要微载体，从而使细胞收获更加简单和高效。使用VitroGel STEM生产的3D干细胞球体可以用于进一步的亚培养、模式分化或重新建立2D培养形态。

作为TheWell Bioscience中国区代理，艾美捷科技强烈推荐TheWell Bioscience热销产品VitroGel STEM。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

工作流概述:

初始静态悬浮培养协议：

推荐材料和试剂

VitroGel STEM

干细胞培养基（mTeSR‐PLUS, StemFlex, mTeSR‐1, Essential 8, NutriStem hPSC 等）

Y‐27632（10 mM/mL）

VitroGel 细胞回收溶液（产品编号 MS03‐100）（可选）

40、70 或 100 µm 可逆筛网（可选）

细胞解离溶液（可选）

圆锥形管（15 mL 或 50 mL）

血清学吸管

细胞培养容器（孔板、T 瓶、Erlenmeyer 烧瓶）

注意：VitroGel STEM 与多种培养容器兼容，用于在静态悬浮培养中生长干细胞。根据每个实验室所需的培养规模和可用系统，可能需要针对不同细胞类型优化培养体积。

设备:

生物安全柜（II级）

CO2 培养箱（37°C，5% CO2 和 95% 湿度）

离心机

移液管

旋转摇床、搅拌式反应器或低速生物反应器（10-40转/分钟，可选）

参考数据:

图1。二维基质培养hPSC的三维悬浮培养

如图1所示，24小时后，小的hPSC球体开始形成。从第1天到第6天，悬浮培养物中的细胞迅速生长，导致健康的

以及高质量的干细胞球体。第3天，细胞数量急剧增加（图1B），球体大小稳步增加（图1C）。hPSC球体显示

浅坑或麻点的特征，指示hPSC标志物的表达，以及健康和高质量干细胞球体的成功扩增。这个

这些球体为研究人员提供了大量健康的hPSC，用于进一步的实验

TheWell Bioscience公司专注于3D细胞培养产品，为细胞再创体内生长环境。VitrogelTM3D 细胞培养水凝胶为无动物源性多糖水凝胶体系，模仿天然细胞外基质环境，可用于悬浮细胞和贴壁细胞的培养，为体内和体外研究提供共通的操作平台。

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