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基于高效微流电动液相色谱系统分离检测强阳离子交换亲水性多肽

阅读:302        发布时间:2019-12-13
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    上海通微分析技术有限公司

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1. 背景介绍
  毛细管电色谱(CEC)是种集高效液相色谱(HPLC)的高选择性和高效毛细管电泳 CE)为体的小型液相色谱技术。自 1974 年第次报道 CEC 以来,随着理论和应用的 发展,CEC 已成为种强大的分离技术。然而,这种技术的发展速度受到了实际问题和困难的阻碍,主要包括色谱柱的制造,再生和仪器有关。在CEC 中,由于焦耳加热,经常遇到形成气泡和干涸的问题。并且因其没有注射阀,难以实现样品的定量注射。
  为了减少气泡的形成,HPLC 泵已经与 CEC 系统相耦合,终形成种被称为高效微 流电动液相色谱系统(eHPLC)的混合技术。在这种新颖的分离技术中,压力和电场都可以施加在填充的毛细管色谱柱上,有利于中性和带电物质的分离。 此外,eHPLC 可实现溶剂的梯度洗脱和定量注射。
  我们研制的eHPLC系统,可用于高效微流电动液相色谱、微流液相和毛细管电泳等实验。并研究了 eHPLC 在亲水性和强离子交换混合模式下多肽的分离。对于多肽等带电物质,eHPLC 模式下的保留机制是基于色谱分离和电泳迁移。因此,可以通过改变电场和压力来调节多肽的洗脱。并且我们评价了亲水性相互作用、离子交换和电迁移对多肽分离的贡献,并讨论了保留机制。用梯度洗脱法分离 eHPLC 系统中的多肽,研究了压力、电场、有机溶剂、pH 值、离子强度等因素对多肽混合物分离的影响。
2.测试条件

3.测试结果Application Note
 


4.
结论
  采用 TriSep ®-3000 高效微流电动液相色谱系统,可以通过改变外加电压和压力来调节多肽等带电化合物的选择性,克服了纯 CEC 中形成气泡的问题。系统的研究了压力、电 场、有机溶剂、pH 值、离子强度等因素对多肽混合物分离的影响。实验结果表明,高效微流电动液相色谱系统,可方便地进行连续梯度洗脱,并可通过液相型注射阀实现定量注射。并且是分离亲水性多肽的种有效方式。
5.配置列表

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