人冠状动脉内皮原代细胞

人冠状动脉内皮原代细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

人冠状动脉内皮细胞分离自冠状动脉组织；冠状动脉是供给心脏血液的动脉，起于主动脉根部，分左右两支，行于心脏表面。采用Schlesinger等的分类原则，将冠状动脉的分布分为三型：右优势型、均衡型、左优势型。左右冠状动脉是升主动脉的第一对分支。左冠状动脉为一短干，发自左主动脉窦，经肺动脉起始部和左心耳之间，沿冠状沟向左前方行后，立即分为前室间支和旋支。前室间支沿前室间沟下行，旋支绕过心尖切迹至心的膈面与右冠状动脉的后室间支相吻合。冠状动脉内皮细胞呈单层扁平分布，是一薄层的专门上皮细胞，它形成冠状动脉的内壁，是血管管腔内血液及其他血管壁（单层鳞状上皮）的接口。内皮细胞是沿着整个循环系统，由心脏直至小的微血管。

方法简介：

公司实验室分离的人冠状动脉内皮细胞采用混合酶短暂消化后组织贴块、结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人冠状动脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

CHI3L1 Others Human 人 CHI3L1 人细胞裂解液   B16(小鼠黑色素瘤细胞)     ICAM1 Others Mouse 小鼠 ICAM-1 / CD54 人细胞裂解液   NCI-H838(人非小细胞肺癌细胞)   CL-0149MCF-7 小鼠原代胸腺成纤维细胞 小鼠原代鼓膜上皮干细胞

红细胞生成素受体(EPOR)重组蛋白 Recombinant Erythropoietin Receptor (EPOR)

CDK5 Protein Human 重组人 CDK5 蛋白 (GST 标签)

FLT3重组小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 Protein

IL17A Protein Canine 重组狗 IL17 / IL17A 蛋白

CRABP1重组人 CRABP1 / RBP5 蛋白 Protein

兔子端粒酶(TE)ELISA 试剂盒

Human ichinella aibody (ichinella Ab) ELISA Kit 人旋毛虫抗体(ichinella Ab)试剂盒

Humanai-lymphocytotoxicaibody,ALA/LCAELISAKit 人抗淋巴细胞毒抗体(ALA/LCA)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanEpidermalgrowthfactor,EGF试剂盒人表皮生长因子(EGF)试剂盒规格：96T/48T

组织PLK3激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

HumanPancreaticAmylase,PAMYELISAKit人胰(PAMY)试剂盒规格：96T/48T

人状瘤病毒抗体IgG(HPV-IgG)试剂盒   96T/48T

人状瘤病毒抗体(HPV)试剂盒   96T/48T

人瘤病毒58（HPV-58）试剂盒   96T/48T

人瘤病毒18（HPV-18）试剂盒   96T/48T

人冠状动脉内皮原代细胞豚鼠甘露聚糖结合凝集素关联丝酸蛋白酶1(MASP1)试剂盒 ，英文名： MASP1 ELISA Kit

Human calnexin (calnexin) ELISA Kit 人钙联蛋白(calnexin)试剂盒

rabbitCoicosterone,COELISAKit 兔子皮质酮/肾上腺酮(CO)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforB7-2/sCD86(MousesolubleClusterofdiffereiation86)ELISAKit小鼠可溶性CD86

线虫甲磺酸乙脂(EMS)诱导突变试剂盒10次

RabbitBcl-2AssaciatedXprotein,BAXELISAKit兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)试剂盒规格：96T/48T

GB重组巨细胞病毒 HCMV Glycoprotein B / gB 蛋白 Protein

TM(Thrombomodulin 0.5mgTM(Thrombomodulin) 血栓调节蛋白多肽

PARP1重组人 PARP-1 / PARP 蛋白 Protein

IL3 Protein Human 重组人 IL3 / IL-3 蛋白

HAVCR1 Protein Human 重组人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白