人骨髓来源内皮祖原代细胞

人骨髓来源内皮祖原代细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传1-2代；不建议多次传代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

人骨髓来源内皮祖细胞分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。内皮祖细胞是血管内皮细胞的前体细胞，亦称为成血管细胞（Angioblast），是一群具有游走特性，能进一步增殖分化的幼稚内皮细胞，缺乏成熟内皮细胞的特征性表型，不能形成管腔样结构，其功能主要为参与了出生后缺血组织的血管发生和血管损伤后的修复。研究显示，内皮祖细胞在心脑血管疾病、外周血管疾病、肿瘤血管形成及创伤愈合等方面均发挥重要作用，并为缺血性疾病的研究治疗提供了新思路，EPCs生物学特性和治疗作用的研究成为这一领域新的热点。

方法简介：

公司实验室分离的人骨髓来源内皮祖细胞采用冲洗骨髓、密度梯度离心、差速贴壁法结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人骨髓来源内皮祖细胞经CD34免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

Chang liver细胞，CCL13张氏肝细胞正常 人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293),APP-PS1细胞 豚鼠皮肤细胞;GP-S3  人脑血管周细胞裂解物HBVCL  小鼠皮层神经胶质细胞(EGFP标记) 小鼠骨骼肌成纤维细胞，NOR-10细胞 小鼠原代胸腺基质细胞 小鼠原代睾丸间质细胞

结合球蛋白(CBG)重组蛋白 Recombinant Corticosteroid Binding Globulin (CBG)

CDK1 Protein Human 重组人 CDC2 Kinase / CDK1 蛋白 (GST 标签)

FGF1重组人 aFGF / FGF1 蛋白 Protein

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

SMR3B重组人 SMR3B 蛋白 (Fc 标签) Protein

兔子高迁移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 试剂盒

People androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 人雄(ASD)试剂盒

Humanai-macrophageaibodyELISAKit 人抗巨噬细胞抗体(ai-macrophageAb)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanepidemicparotitis,EP试剂盒人流行性腮腺(EP)试剂盒规格：96T/48T

组织PKG激酶总活性定量试剂盒(A/B/C)20次

HumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit人胰多肽(PP)试剂盒规格：96T/48T

人粘蛋白21(MUC21)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human MUC21 (Mucin 21) ELISA Kit

人伴侣蛋白10(CPN10)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human CPN10 (Chaperonin 10) ELISA Kit

人趋化素(CHEM)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human CHEM(Chemerin) ELISA Kit

人趋化因子C-C-基元配体1(CCL1)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human CCL1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 1) ELISA Kit

人骨髓来源内皮祖原代细胞豚鼠谷转酶(ALT)试剂盒 ，英文名： ALT ELISA Kit

Human calmodulin (CAM) ELISA Kit 人钙调素(CAM)试剂盒

rabbitEndostatin,ESELISAKit 兔子内皮抑素(ES)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBACE2ELISAKit大鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶2

线虫繁殖培养试剂盒10次

rabbitCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit兔子Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)试剂盒规格：96T/48T

LTA4H重组小鼠 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 Protein

Batroxobin Protein 蛇毒巴曲酶全蛋白 1mgBatroxobin Protein 蛇毒巴曲酶全蛋白

CALML3重组人 CALML3 蛋白 Protein

IL23 Protein Human 重组人 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白

HGF Protein Rat 重组大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。