人肝窦内皮原代细胞

人肝窦内皮原代细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

人肝窦内皮细胞细胞分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。肝窦内皮细胞（SEC）是肝脏内所占比例高的非实质细胞，位于肝窦腔与肝细胞之间，具有物质转运、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于拥有一般细胞所没有的窗孔结构、细胞间连结松散、内皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性，从而达到快速交换各种大小分子的目的。肝在遭到多种病原侵袭时，肝窦内皮细胞窗孔逐渐减少或消失，内皮下基膜形成，产生类似于连续型毛细血管的结构，这一过程称为肝窦毛细血管化。它由多种因素引起，其过程极复杂，在多种肝病的发病前期阶段均有出现，近年来受到广泛关注。

方法简介：

公司实验室分离的人肝窦内皮细胞采用混合酶灌流消化、反复低速离心、密度梯度离心法，并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人肝窦内皮细胞经CD31、CD14免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

CFHR2 Others Human 人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 人细胞裂解液   IFNA8 Others Human 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人细胞裂解液   CM-H046人肝星形细胞中和液TNS  b16   小鼠黑色素瘤细胞 小鼠原代嗅球神经干细胞 人原代结肠粘膜上皮细胞

2,4-D/BSA 2，4-二氯苯氧乙酸偶联牛血清白蛋白 1mg2,4-D/BSA 2，4-二氯苯氧乙酸偶联牛血清白蛋白

AK4 Protein Human 重组人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 标签)

PLA2G12B重组小鼠 PLA2G12B / PLA2G13 蛋白 (His 标签) Protein

LTBR Protein Rat 重组大鼠 LTBR / TNFRSF3 蛋白 (His 标签)

USP46重组人 / 小鼠 USP46 蛋白 (N-SUMO) Protein

兔子血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA 试剂盒

Rat angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 大鼠血管生成素受体Tie2(ANG-R-Tie2)试剂盒

Humanai-ribosomalPproteinaibody,ARPA/Rib-PELISAKit 人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)试剂盒 进口分装

HumanD-Dimer,D2D试剂盒人D二聚体(D2D)试剂盒

组织IRAK1激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

Humanplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit人纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)试剂盒

小鼠纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)试剂盒   96T/48T

小鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)试剂盒   96T/48T

小鼠纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)试剂盒   96T/48T

小鼠纤连蛋白(FN)试剂盒   96T/48T

人肝窦内皮原代细胞小鼠戊糖素(Peosidine)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human Phosphoglucomase (PGM) ELISA Kit 人0酸葡萄糖变位酶(PGM)试剂盒

HumanAngiotensinaseELISAKit 人血管紧张肽酶(Angiotensinase)试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenIerferonγ,IFN-γ试剂盒鸡γ干扰素(IFN-γ)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞ERBETA蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

Mouseglycogensyhasekinase,GSKELISAKit小鼠糖原合成酶激酶(GSK)试剂盒规格：96T/48T

CD86重组大鼠 CD86 / B7-2 蛋白 Protein

HIV gp120 艾滋病病毒(抗原 0.5mgHIV gp120 艾滋病病毒(抗原)

HSPD1重组人 HSPD1 / HSP60 蛋白 (His & GST 标签) Protein

IL27 Protein Human 重组人 IL27 / Interleukin-27 蛋白

HDAC8 Protein Mouse 重组小鼠 HDAC8 / HDACL1 蛋白

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。