产品分类:抗体 / 一抗
英文名称:phospho-Filamin A (Ser1083)
中文名称 磷酸化细丝蛋白A抗体
英文别名 Filamin A (phospho S1083); p-Filamin A (phospho S1083); ABP 280; ABP 280 like protein; ABP-280; ABP280A; ABPA antibody Actin binding like protein; Actin binding protein 280; Actin-binding protein 280; Alpha filamin; Alpha-filamin; APBX; cb967; Dilp2; Endothelial actin binding protein; Endothelial actin-binding protein; Filamin 1; Filamin A alpha actin binding protein 280; Filamin A; Filamin-1; Filamin-A; FLN; FLN-A; FLN1; FLNA; FLNA_HUMAN; FMD; MNS; NHBP; Non muscle filamin; Non-muscle filamin; OPD; OPD1; OPD2.
交叉反应:Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
标记: Unconjugated
抗体来源: Rabbit
抗体类型: Polyclonal
免疫原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human FLNA around the phosphorylation site of Ser1083
蛋白细胞定位: 细胞浆
纯化方法: affinity purified by Protein A
亚型 IgG
性状: Liquid
浓度: 1mg/ml
储存液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glyc
公司专业供应的抗体,是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,价格实惠,多种规格供应,售后完善。
产品名称 | 规格 | 保存条件 |
phospho-Filamin A (Ser1083)抗体 | 50ul 100ul 200ul | Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. |
背景资料:The protein encoded by this e is an actin-binding protein that crosslinks actin filaments and links actin filaments to membrane glycoproteins. The encoded protein is involved in remodeling the cytoskeleton to effect changes in cell shape and migration. This protein interacts with integrins, transmembrane receptor complexes, and second messengers. Defects in this e are a cause of several syndromes, including periventricular nodular heterotopias (PVNH1, PVNH4), otopalatodigital syndromes (OPD1, OPD2), frontometaphyseal dysplasia (FMD), Melnick-Needles syndrome (MNS), and X-linked conital idiopathic intestinal pseudoobstruction (CIIPX). Two transcript variants encoding different isoforms have been found for this e.[provided by RefSeq, Mar 2009]
抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏佐剂和弗氏不佐剂
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。
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标记法:
直接标记法 | 间接标记法 |
抗体的准备:取提纯的Ig溶液测定蛋白质含量,置于三角烧瓶中加入生理盐水和0.5mol/L pH9.5碳酸盐缓冲液,冰槽中搅拌5~10min; 荧光素的准备:按每毫克蛋白质加0.01~0.02mg的FITC计算,准确称取后加入抗体溶液中; 标记:边搅拌边加入荧光素,避免粉末黏附于壁上,置于4℃冰箱或冰库继续搅拌12~18h; 透析:结合完毕后,先将结合物以3000r/min离心20min,除去少量沉淀物后装入透析袋中再置于pH8.0缓冲盐的烧杯中透析过夜; 过柱:取透析过夜的标记物,过葡聚糖凝胶G-25或G-50柱,分离游 | 抗体的准备:0~4℃下,用0.01mol/L pH8.0 PBS将待标记的抗体蛋白溶液稀释到浓度为30~40mg/ml,置于三角烧瓶内放入冰槽中; 荧光素的准备:按每毫克蛋白质加入0.01mg的荧光素称取,溶解于等量的3%重碳酸钠水溶液中;将抗体蛋白溶液与FITC溶液等量混合,在0~4℃中搅拌18~24h,充分搅匀; 透析或过柱层析。 |
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
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抗体的制备过程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。