详细介绍
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
产品属性:
中文名称:JC-10荧光探针
英文名称:JC-10
产品规格:1mg|5mg
发货周期:1~3天
商品介绍:
JC-10是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时,JC-10聚集在线粒体的基质中,形成聚合物,可以产生红色荧光;在线粒体膜电位较低时,JC-10不能聚集在线粒体的基质中,此时JC-10为单体,可以产生绿色荧光。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。激发波长Ex510nm,发射波长Em525nm。 线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。通过JC-10从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降,同时也可以用JC-10从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。JC-10单体的大激发波长为515nm,大发射波长为529nm;JC-10聚合物的大激发波长为585nm,大发射波长为590nm。实际观察时,使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。 储存条件:-20℃干燥避光保存,保质期12个月。 |
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
氧苄啶(标准品)英文名称: Ketorolac分子伴侣复合体TCP-1β抗体包装1g
氧普(标准品)英文名称: Leflunomide分裂周期蛋白25C抗体包装5g
异靛(标准品)英文名称: Leflunomide过敏C4/补体C4抗体包装1g
间基酚(标准品)英文名称: Levofloxacin Hemihidrated脂肪结合蛋白3抗体包装1g
间二酚(标准品)英文名称: Levofloxacin Hemihidrated16号染色体开放阅读框48抗体包装250mg
间酚(标准品)英文名称: Lornoxicam色P450 19抗体包装25g
间羟基(标准品)英文名称: LornoxicamCD28抗体包装5g
交沙霉(标准品)英文名称: Losartan Potassium1号染色体开放阅读框195抗体包装1ml
金O(标准品)英文名称: Losartan PotassiumNK抑制性受体2DL1抗体包装25ml
金橙II(标准品)英文名称: Masitinib3号染色体开放阅读框67抗体包装5ml
金刚烷(标准品)英文名称: Mecillinamκ-酪蛋白抗体包装1g
金诺芬(标准品)英文名称: Medroxyprogesterone 唾液结合性免疫球蛋白样凝集7抗体包装25g
伐伦克林(标准品)英文名称: Medroxyprogesterone Cappuccino蛋白抗体包装5g
罗格列(标准品)英文名称: Methimazole前列腺过氧化物合成3抗体包装1g
美托洛尔(标准品)英文名称: Methimazole补体因子H相关蛋白1抗体包装250mg
无乳链球菌 兰氏B群Streptococcus│agalactiae 质量规格:HPLC>99%,标准品腺病IgM试剂盒甜菊双糖苷;Steviolbioside
条纹拟盘多毛孢Pestalotiopsis│virgatula 质量规格:≥900μg/mg,USP33,BR腺病IgG试剂盒匙羹藤I;GyMneMic acid
韩国假单胞菌Pseudomonas│koreensis 质量规格:效价测定腺病36抗体试剂盒脱氧;Deoxyaconitine
JC-10荧光探针米曲霉 4-溴-9,9'-螺二芴抗RA33IgG抗体Elisa
Bacillus tequilensis Nα-对甲苯磺酰-L-精氨酸半胱氨酸蛋白10Elisa
科氏葡萄球科氏亚种 2,2-双(4-氧苯基)烷基质金属蛋白9Elisa
水生哈萨克斯坦酵母 5,6,7,7a-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2(4H)-酮盐酸盐碳酸酐Elisa
美味牛肝 α-(4-基)二苯甲丝氨酸脱水Elisa
大肠埃希氏 利赛膦酸钠抗膜联蛋白A5抗体Elisa
爪哇根霉 N-Cbz-L-蛋氨酸抗磷脂酰乙抗体Elisa
链格孢 3-羟基-3-甲基-2-丁酮蛋白S抗体Elisa
枯草芽胞杆 3,4-二氟苯甲蛋白C抗体Elisa
囊毛霉 4-(二甲基氨基)苯酸盐酸盐抗波形蛋白抗体Elisa
枯草芽孢杆 4-溴-2-氟β2糖蛋白抗体Elisa
金白F4(金针菇) 4-溴-2-氟-苄泛化蛋白Elisa
美澳型核果褐腐病 Boc-L-2,4-二氯苯氨酸载脂蛋白FElisa
季也蒙迈耶氏酵母 N-(叔丁氧羰基)-3-氟-L-苯氨酸γ-谷氨酰基转氨5Elisa
嗜热脂肪芽胞杆 D-2,4-二氯苯氨酸烯酰水合1Elisa