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Caspase-2活性测定试剂盒

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更新时间:2022-04-21 14:11:39浏览次数:265

联系我们时请说明是化工仪器网上看到的信息,谢谢!

产品简介

供货周期 现货 规格 20T|50T|100T
货号 GOY-01X9739 应用领域 化工
主要用途 公司产品仅供科研 英文名称 Caspase-2 Activity colorimetric assay Kit
Caspase-2活性测定试剂盒公司正在出售的产品:Kif14 protein 驱动蛋白家族Member14蛋白抗体4-溴丁 98%
KIF17 驱动蛋白家族KIF17抗体二聚环戊二烯 97%,Endo
Kiss-1 肿瘤转移抑制因抗体二聚环戊二烯 98%,Endo + Exo
Klf4 肠道内富含的Kruppel样因子/上皮锌指蛋白4抗体二聚环戊二烯 97%,Exo
KLF5 肠道内

详细介绍

以下是细胞生物学试剂的详细介绍:

中文名称

英文名称

产品规格

发货周期

Caspase-2活性测定试剂盒

Caspase-2 Activity colorimetric assay Kit

20T|50T|100T

1~3天


商品介绍:

本试剂盒适用于测定哺乳动物组织、细胞caspase-2活性。测定原理基于Caspase-2特异水解其多肽底物N-acetyl-Val-Asp-Val-Ala-Asp-pNA(Ac-VDVAD-pNA),释放出游离的硝基pNA,后者呈黄色在405nm具有大吸收峰,用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于Caspase-2的水解活性。

细胞凋亡属于程序化细胞死亡,可见于各种器官和细胞,在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。Caspase-2也称Ich-1或Nedd-2,在细胞凋亡的信号转导过程中被激活。

运输及保存:试剂常温运输。到达后按要求储存,1年内稳定。

所需仪器:酶标仪与96孔酶标板;或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。

工作波长:大吸收波长405nm,如不具备也可在400~450nm范围内测定,但灵敏度略降。

公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

操作步骤:

1. 样品染色

1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。

2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。

对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。

3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。

4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。

2. 样品检测

1) 流式细胞仪检测:

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。

建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。

2) 荧光显微镜检测:

染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
灰黄霉(标准品)英文名称: Ethionamide补体C1RL链多肽抗体包装5g

灰黄霉(标准品)英文名称: Etravirine周期M2抗体包装100g

回拉西坦;茴拉西坦(标准品)英文名称: Famotidine周期T2抗体包装25g

茴三硫(标准品)英文名称: Famotidine周期K抗体包装5g

茴香(标准品)英文名称: Febuxostat抗菌肽CAMP抗体包装25g

(标准品)英文名称: Febuxostat5号染色体开放阅读框4抗体包装5g

肌苷(标准品)英文名称: Phenacetin4号染色体开放阅读框44抗体包装1g

肌酐(标准品)英文名称: Phenacetin4号染色体开放阅读框33抗体包装5g

肌(标准品)英文名称: Fingolimod HCL /FTY-7204号染色体开放阅读框42抗体包装1g

吉非罗齐(标准品)英文名称: Fingolimod HCL /FTY-7205号染色体开放阅读框33抗体包装5g

吉莫斯特;吉美嘧啶(标准品)英文名称: Flufenamic acid9号染色体开放阅读框89抗体包装5mg

吉它霉(标准品)英文名称: Flufenamic acid19号染色体开放阅读框66抗体包装1mg

己内酰(标准品)英文名称: Flumazenil21号染色体开放阅读框55抗体包装5g

加巴喷丁(标准品)英文名称: Flumazenil21号染色体开放阅读框70抗体包装25g

加替沙星(标准品)英文名称: Fluoxetine Hydrochloride胱抑A/半胱蛋白抑制剂A抗体包装5g

里拉微球菌Micrococcus│lylae 质量规格:>98%小扁豆结合型胎蛋白/胎蛋白异质体3试剂盒五味子酯;Schisantherin

葡萄座腔菌Botryosphaeria│dothidea (Moug.) Ces. & De Not. 质量规格:≥99.0%,BR小扁豆结合型胎蛋白/胎蛋白异质体2试剂盒;Aconitine

小单孢菌属Micromonospora│sp. 质量规格:含量>99.0%小扁豆结合型胎蛋白/胎蛋白异质体1试剂盒五味子;Schisandrin A
Caspase-2活性测定试剂盒秦氏蜜环 邻苯二乙视网膜母瘤蛋白 1Elisa

泡盛曲霉 庚二酸二乙酯丝酸酮酸氨基转移Elisa

枯草芽孢杆 1-甲基-1H-咪唑-2-羧酸可溶性CD25Elisa

汉逊德巴利酵母汉逊变种 4-甲基噻唑-5-甲酸核苷二磷酸激AElisa

不解糖鞘氨单胞 苯基乙烯基亚砜低氧诱导因子1α抗体Elisa

棒曲霉 2,4,5-三氟甲酯白介1受体抗体Elisa

麻脸蘑菇 辛酸异戊酯前列腺Elisa

杏鲍菇 2-氨基-4-氟苯并噻唑幽门螺杆IgA抗体Elisa

炭黑曲霉 2-氨基-5-氯苯并噻唑L-羟脯氨酸Elisa

大肠埃希氏 3-氟-4-卵磷脂胆固酰基转移Elisa

类芽孢杆属 6-硝基藜芦基质Gla蛋白Elisa

亚细亚属 2-氟-5-乙酸内质网氨基肽1Elisa

东方伊萨酵母 3,4,5-基肉桂酸甲酯天疱疮抗体Elisa

根瘤 TAE684 (NVP-TAE684)NADPH氧化Elisa

青紫链霉 三单甲半胱氨酸蛋白8Elisa

 


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