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详细介绍
商品介绍：
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒是用来检测细胞在凋亡过程中细胞核DNA的断裂情况， 其原理是生物素（Biotin）标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂DNA的3′-OH末端，并可与连接辣根过氧化酶的链霉亲和素（Streptavidin-HRP）特异结合，在辣根过氧化酶底物二氨基联（DAB）的存在下，产生很强的颜色反应（呈深棕色），特异准确地定位正在凋亡的细胞，因而在普通显微镜下即可观察和计数凋亡细胞；由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3′-OH形成，很少能够被染色。 二、试剂盒组份 组份 Cat：KFS433 储存条件 Biotin-11-dUTP 20μl -20℃，避光，12个月 储存条件：-20℃避光，有效期12个月 |
以下是细胞生物学试剂的详细介绍：
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Biotin-11-dUTP | 20μl | 1～3天 |
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
酚酞（标准品）英文名称： Levothyroxine Sodium 表面趋化因子受体4相关蛋白2抗体包装1g
（标准品）英文名称： Lidocaine肉碱棕榈酰基转移2抗体包装5g
夫拉扎勃（标准品）英文名称： Lidocaine肉碱氧位基转移抗体包装100g
夫西地(标准品)英文名称： Lidocaine HClIV型胶原α3结合蛋白抗体包装25g
夫西地钠(标准品)英文名称： Lidocaine HCl肉碱棕榈酰基转移1B抗体包装5g
呋喃杂质A（标准品）英文名称： Lisinopril Dihydrate胆固27α羟化抗体包装25g
呋喃妥因（标准品）英文名称： Lisinopril Dihydrate胆固24α7羟化抗体包装5g
呋喃西林（标准品）英文名称： Lobeline Hydrochloride色P450 4A1抗体包装25g
呋喃唑（标准品）英文名称： Lonidamine色P4504A22抗体（脂肪Ω羟化）包装5g
呋塞米（标准品）英文名称： Lopinavir周期蛋白依赖性激抑制剂2D抗体包装1g
伏格列波糖(标准品)英文名称： Lopinavir胆固24S－羟化包装5g
伏格列波糖（标准品）英文名称： Loratadine猪瘟病抗体包装100g
伏立康唑（标准品）英文名称： Loratadine色c氧化亚型2抗体包装25g
伏立诺他（标准品）英文名称： Melatonine周期G2抗体包装5g
胞嘧啶/5-胞嘧啶（标准品）英文名称： Melatonine铜蓝蛋白抗体包装1g
链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格：HPLC>98%,标准品信号识别颗粒抗体试剂盒伪原薯蓣皂苷;Pseudoprotodi
黄曲霉Aspergillus│flavus 质量规格：>99.0%,BR信号传导子及转录激活子6试剂盒王不留行黄苷;Vaccarin
枯草芽孢杆菌Bacillus│subtilis 质量规格：HPLC>98%,标准品信号传导子及转录激活子5试剂盒乌药环戊烯二;Methyllind
生物素标记dUTP溶液(0.25mM)金黄壳囊孢 Gly-Phe-Asp-Leu-Asn-Gly-Gly-Gly-Val-Gly热休克蛋白aElisa
海角副球 2-乙丝氨酸肽抑制因子Kazal型1Elisa
拟茎点霉 5-硝基-2,3-二氯吡啶氧化应激反应诱导凋亡蛋白Elisa
平田头菇 5-硝基-2-羟基-3-氯吡啶唾液淀粉Elisa
广岛链霉 Olaparib (AZD2281, Ku-0059436)天青杀；肝结合蛋白Elisa
硬结节杆 1-苊酮核酸外切Elisa
果生链核盘 4-溴-3-氟苄ATP合6Elisa
异常汉逊酵母变种 3-氟-4-吡啶Trim22分子Elisa
芬娜冬菇 反式-4-甲氧基查耳酮Trim41分子Elisa
枯草芽胞杆枯草亚种 硬脂酸镉Trim5分子Elisa
特异青霉（产黄青霉） 甲亢平前列腺E代谢物Elisa
血痕韧革 Cyprosulfamide纤维源性蛋白Elisa
盐古杆 4-苯氧基二氢还原Elisa
高卢蜜环 1-甲基-3-苯基丝氨酸；苏氨酸蛋白激1Elisa
球孢白僵 2-[[2-(二甲氨基)乙基]甲氨基]乙二酰Elisa
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