小鼠直肠平滑肌原代细胞

小鼠直肠平滑肌原代细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

小鼠直肠平滑肌细胞分离自直肠组织；直肠为大肠的未段，位于小骨盆内。上端平第3骶椎处接续乙状结肠，沿骶骨和尾骨的前面下行，穿过盆膈，下端以而终。直肠上端的大小似结肠，其下端扩大成直肠壶腹，是粪便排出前的暂存部位，下端变细接管。直肠在盆腔内的位置与骶椎腹面关系密切，与骶椎有相同的曲度。直肠周围多脂肪、无纵带，位于膀胱和生殖器官的背侧。直肠平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。直肠的动脉血供主要是来自肠系膜下动脉的直肠上动脉，来自髂内动脉的直肠中动脉和来自髂内动脉的直肠下动脉。平滑肌收缩是胃肠蠕动中基本的运动方式；肠炎时由于平滑肌特殊肌动蛋白的增加导致了平滑肌层的增厚。平滑肌肌动蛋白可能影响收缩力的产生，这进一步证明了炎症时的肠平滑肌细胞具有可塑性。利用肠平滑肌细胞的培养，可以帮助了解收缩、增殖和胃肠道结缔组织对平滑肌细胞的反应。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠直肠平滑肌细胞采用蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠直肠平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

大额牛与婆罗门牛杂交F1代皮肤成纤维样细胞;BOS-6  CPB2 Others Human 人 CPB2 / Carboxypeptidase-B2 人细胞裂解液   NELL2 Others Human 人 NELL2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 人原代外周血间充质干细胞 大鼠原代主动脉外膜成纤维细胞

AQP-2 (aquaporin Protein-2 0.5mgAQP-2 (aquaporin Protein-2) 水通道蛋白-2(抗原)

CCL17 Protein Human 重组人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白

EFNA5重组小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签) Protein

CD79B Protein Rat 重组大鼠 CD79B / B29 蛋白

IL36A重组人 IL1F6 / IL36A 蛋白 Protein

大鼠肺癌肿瘤抑制因子1(TSLC1)试剂盒 ，英文名： TSLC1 ELISA Kit

Porcine soluble iercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) ELISA Kit 猪可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)试剂盒

猪特定基因序列(Porcine)核酸试剂盒 48T

CLIAKitforMAO(Humanmonoamineoxidase)ELISAKit人单胺氧化酶

体液样品组织蛋白酶B(CATHEPSINB)活性比色法定量试剂盒20次

ELISAKitSAA血清样蛋白A

血清样蛋白   英文名称：   serum amyloid A protein   规格：      英文缩写：   SAA

Salusin-α   英文名称：   Salusin-α   规格：      英文缩写：   Salusin-α

干细胞因子   英文名称：   stem cell factor   规格：      英文缩写：   SCF

干细胞因子受体   英文名称：   stem cell factor receptor   规格：      英文缩写：   SCF R

小鼠直肠平滑肌原代细胞小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human ai apolipoprotein aibodies A1 (Apo A1) ELISA Kit 人抗载脂蛋白抗体A1(Apo A1)试剂盒

HumanAicenomereAibody,ACA/CENPELISAKit 人抗着丝点抗体(ACA/CENP)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforAA(HumanArachidonicAcid)ELISAKit人花生四烯酸

乙醇沉淀法DNA萃取试剂盒20次

MouseNervegrowthfactor,NGFELISAKit小鼠神经生长因子(NGF)试剂盒规格：96T/48T

IL33重组人 IL33 / Interleukin-33 / NF-HEV 蛋白 Protein

酸性葡糖苷酶α(GαA)重组蛋白 Recombinant Glucosidase Alpha, Acid (GaA)

CCL2重组人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 Protein

CD8A Protein Human 重组人 CD8A / MAL 蛋白

HA Protein H1N1 重组甲型流感 H1N1 (A/Solomon Islands/3/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白