小鼠椎间盘髓核原代细胞

小鼠椎间盘髓核原代细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每3-4天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传3-5代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

小鼠椎间盘髓核细胞分离椎间盘组织；椎间盘是位于脊柱两椎体之间，分为中央部的髓核，富于弹性的胶状物质；周围部的纤维环，由多层纤维软骨环按同心圆排列。上下有软骨板，是透明软骨复盖于椎体上，下面骺环中间的骨面。上下的软骨板与纤维环一起将髓核密封起来。纤维环由胶原纤维束的纤维软骨构成，位于髓核的四周。纤维环的纤维束相互斜行交叉重叠，使纤维环成为坚实的组织，能承受较大的弯曲和扭转负荷。髓核，是乳白色半透明胶状体，富于弹性，为椎间盘结构的一部分，位于两软骨板与纤维环之间。由纵横交错的纤维网状结构即软骨细胞和蛋白多糖黏液样基质构成的弹性胶冻物质。婴幼儿时期的髓核含水量为80%-90%，即使到了老年，其含水量也在70%上下。髓核在出生时体积大而松散，位于椎间盘的中央，至成年时位置移至椎间盘的中后部；在成年以前构成髓核的主要物质是大量蛋白多糖复合体、胶原纤维和纤维软骨，随着年龄的增长，髓核中的蛋白多糖解聚增多，水分逐渐减少，胶原增粗并逐渐被纤维软骨所替代。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠椎间盘髓核细胞采用胶原酶-蛋白酶混合消化法并结合软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠椎间盘髓核细胞经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

大鼠肠静脉内皮细胞 大鼠癌细胞;SHZ-88 肝癌细胞，BEL-7405细胞 MEF细胞，早代小鼠胚胎成纤维细胞  DCLK1 Others Human 人 DCAMKL1 / DCLK1 (aa 1-705) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 人原代听神经瘤细胞永生化细胞 大鼠原代角膜基质细胞

POTE锚蛋白域家族成员G(POTEG)重组蛋白 Recombinant POTE Ankyrin Domain Family, Member G (POTEG)

CEACAM3 Protein Human 重组人 CEACAM3 / CD66d 蛋白

GSK3B重组小鼠 GSK3B 蛋白 Protein

PDCD1 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 PD1 / PDCD1 / CD279 蛋白 (Fc 标签)

TNFRSF19重组人 TNFRSF19 / TROY 蛋白 (Fc 标签) Protein

大鼠芳烃受体核转位因子样蛋白1(ARL)试剂盒 ，英文名： ARL ELISA Kit

Porcine soluble Vascuolar cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 猪可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)试剂盒

牛特定基因序列(Bovine)核酸试剂盒 48T

CLIAKitforMAGAb(Humanai-myelinassociatedglycoproteinaibody)ELISAKit人抗髓鞘相关糖蛋白抗体

体液(NO)活性荧光定量试剂盒50次

ELISAKitEMP红细胞膜蛋白

小鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)试剂盒   96T/48T

小鼠血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)试剂盒   96T/48T

小鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)试剂盒   96T/48T

小鼠血管紧张素转换酶（ACE）试剂盒   96T/48T

小鼠椎间盘髓核原代细胞小鼠(FA)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human soluble vascular cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 人可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)试剂盒

Humanarylhydrocarboeceptor,AhRELISAKit 人芳香烃受体(AhR)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor16-AlphaOHE-1(Human16-AlphaHydroxyesogen1)ELISAKit人16α羟基雌同1

饮料镁离子浓度酶反应光谱法定量试剂盒20次

MouseLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit小鼠可溶性瘦素受体(sLR)试剂盒规格：96T/48T

LEP重组人 Leptin 蛋白 Protein

糖原0酸化酶M(PYGM)重组蛋白 Recombinant Glycogen Phosphorylase, Muscle (PYGM)

AOC1重组人 AOC1 / Diamine oxidase 蛋白 Protein

IL18R1 Protein Human 重组人 IL18R1 / CD218a 蛋白 (His & Fc 标签)

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Common magpie/Hong Kong/2256/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。