小鼠椎间盘纤维环原代细胞

小鼠椎间盘纤维环原代细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传3-5代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

小鼠椎间盘纤维环细胞分离自椎间盘组织；椎间盘是位于脊柱两椎体之间，由软骨板、纤维环、髓核组成的一个密封体。上下有软骨板，是透明软骨复盖于椎体上，下面骺环中间的骨面。上下的软骨板与纤维环一起将髓核密封起来。纤维环由胶原纤维束的纤维软骨构成，位于髓核的四周。纤维环的纤维束相互斜行交叉重叠，使纤维环成为坚实的组织，能承受较大的弯曲和扭转负荷。纤维环的前侧及两侧较厚，而后侧较薄。纤维环的前部有强大的前纵韧带，后侧的后纵韧带较窄、较薄。纤维环细胞密度为9000个细胞/mm3，其外层的细胞呈梭型，主要属于纤维细胞，内层细胞呈圆形，主要属于软骨细胞。在培养的情况下，用透射电镜观察则有许多共同的超微结构表现，它们的核较圆，核仁较明显。细胞质内可见大量的附有核糖体颗粒的粗面内质网和滑面内质网。细胞质内线粒体多，为椭圆形，有的可看到双层单位膜，由单位膜包绕初级深酶体和次级深酶体。细胞质内有一系列的扁平囊及小泡主成的高尔基复合体和分泌颗粒，纤维环细胞合成分泌蛋白多糖及胶原纤维的能力很旺盛，保证纤维环生理代谢活动所需的构造物质的供给。一但这种供给减少，纤维环的生物性能就会减弱，椎间盘开始退变。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠椎间盘纤维环细胞采用胶原酶-蛋白酶联合消化法并结合软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠椎间盘纤维环细胞经Ⅰ型胶原蛋白免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

大鼠垂体瘤细胞;GH3  小鼠膀胱平滑肌细胞   EB病毒转化的绒猴淋巴细胞;B95-8  3T3-Swiss albino细胞，胚胎成纤维细胞 人胰腺癌细胞,CRL细胞 CM-M048小鼠肠巨噬细胞MET Others Rat 大鼠 c-MET 人原代胎盘周细胞 猪原代气管上皮细胞

rHBeAg(Hepatitis B Virus E Antigen protein 100ugrHBeAg(Hepatitis B Virus E Antigen protein) 重组乙肝病毒e抗原

CCL16 Protein Human 重组人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白

HA重组甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

GZMH Protein Human 重组人 Granzyme H 蛋白

VNN1重组人 VNN1 / Vanin-1 蛋白 Protein

大鼠泛素连接酶(E3/UBPL)试剂盒 ，英文名： E3/UBPL ELISA Kit

Pig phosphorylation of exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 猪0酸化细胞外信号调节激酶(pERK)试剂盒

羊特定基因序列(Ovine)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforMAdCAM-1(Humanmucosaladdressincelladhesionmolecule-1)ELISAKit人黏膜地址素细胞黏附分子

体液乙酰酯酶活性比色法定量试剂盒20次

ELISAKitVTG鲤鱼卵黄蛋白原

小鼠总   英文名称：   Mouse Total Cholesterol   规格：      英文缩写：   TC

小鼠坏死因子   英文名称：   Mouse Total Tumor Necrosis Factor   规格：      英文缩写：   TNF

小鼠转铁蛋白受体   英文名称：   Mouse ansferrin Receptor   规格：      英文缩写：   TFR

小鼠转移趋化生长因子β   英文名称：   Mouse ansforming Growth Factor β   规格：      英文缩写：   TGFβ

小鼠椎间盘纤维环原代细胞小鼠受体(FOLR)试剂盒 96T/48T

Residues of rat and bovine serum albumin detection ELISA Kit 大鼠的牛血清白蛋白残留检测试剂盒

HumanSpecifieMacrophageArmingPaetot,SMAFELISAKit 人特异性巨噬细胞武装因子(SMAF)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor17-KSELISAKit大鼠17-同类固醇

饮料抗坏血酸比色法定量试剂盒20次

MouseLeptospiraIgG,LepIgGELISAKit小鼠钩端IgG(LepIgG)试剂盒96T96T

SPINK4重组小鼠 SPINK4 蛋白 (Fc 标签) Protein

酸脱氢酶0酸酶(PDP)重组蛋白 Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase (PDP)

COMMD9重组人 COMMD9 蛋白 Protein

CD300A Protein Human 重组人 CD300A / CMRF-35H / IGSF12 蛋白

DDR2 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白