小鼠浦肯野原代细胞

小鼠浦肯野原代细胞公司正在销售的产品：小鼠原代浦肯野细胞 293ET(人胚细胞（SV40T和EBNA1基因修饰细胞）) HMSC-bm 人间充质干细胞－骨髓 1ml/T75 Lewis 小鼠肺癌细胞 RES 大鼠胚胎皮肤成纤维样细胞 人原代角膜基质细胞

小鼠浦肯野原代细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 神经元细胞样

传代特性 不增殖；不传代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

 

小鼠浦肯野细胞分离自小脑皮质组织；小脑的表面被覆着一层灰质，叫小脑皮质，小脑皮质分为3层，从表及里分别为分子层、浦肯野细胞层和颗粒细胞层。皮质里含有星状细胞、篮状细胞、浦肯野细胞、高尔基细胞和颗粒细胞等5种神经元。浦肯野细胞发出的轴突组成小脑皮质的传出纤维，终止于小脑白质内的神经核。浦肯野细胞（Purkinje cell）是从小脑皮质发出的能够传出冲动的神经元。人的小脑皮质约有1500万个浦肯野细胞。浦肯野细胞还广泛分布于心室。显著的电生理特点是传导性强，传导速度快，可达4000mm/s。属快反应自律型细胞，具有舒张期自动除极化的性能，因而有自律性，但自律性强度明显低于窦房结P细胞。这类细胞常常平行排列，细胞内电阻低，只有心室细胞的1/3。小脑：浦肯野细胞是小脑皮质中最大的神经元，细胞体呈梨形，顶端发出2~3条粗大的主树突，向外伸入分子层。主树突沿途分支繁茂，形如展开的、扁薄的扇形，铺展在与小脑叶片长轴垂直的平面上。树突分支上有大量的树突棘，与传入纤维构成广泛的突触联系，接受传入小脑的全部信息。轴突由细胞底部（与主树突相对方向）发出，细长，离开胞体不远便形成有髓神经纤维，向内经颗粒层离开皮质进入白质，组成小脑皮质的传出纤维，终止于小脑内部的神经核团。一个浦肯野细胞的轴突约形成500个终末膨大，约与小脑深部核团的35个神经元形成突触。心脏浦肯野细胞常常平行排列，几个细胞互相以浆膜连接排成一个小束，小束外包绕着基底膜。细胞内含肌原纤维很少，胞浆区内充满糖原颗粒、线粒体和肌浆网，细胞内电阻低，只有心室细胞的1/3。浦肯野细胞内无横管系统，但膜电容比收缩细胞大，可能是由于其闰盘结构广泛而复杂，提供了较大的表面积的缘故。浦肯野细胞闰盘的主要成分是缝隙连接，粒着膜占的比例很少，这些可能是构成浦肯野细胞传导快的形态学基础。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠浦肯野细胞采用蛋白酶消化法结合神经元专用培养基、化学试剂抑制法筛选制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶

质量检测：

公司实验室分离的小鼠浦肯野细胞经Neph3免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

EL4IL-2细胞，淋巴瘤细胞 人急性早幼粒白血病细胞,NB4细胞 人晶体上皮细胞永生系;SRA01/04(HLE)  NCI-H345细胞，人小细胞肺癌细胞 小鼠脑神经瘤细胞,Neuro-2a细胞 CM-H119人脑膜细胞人脑血管平滑肌细胞 小鼠原代角膜基质细胞 人原代尾椎肿瘤细胞

ERK(Extracellular signal-regulated kinase 0.5mgERK(Extracellular signal-regulated kinase) 原活化蛋白激酶抗原

ENPP2 Protein Human 重组人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白

IL25重组大鼠 Interleukin 25 / IL25 / IL17E 蛋白 (Fc 标签) Protein

CNTNAP2 Protein Mouse 重组小鼠 CNTNAP2 / CASPR2 蛋白

FGFR4重组人 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 Protein

大鼠乙酰转移酶(ChAT)试剂盒 ，英文名： ChAT ELISA Kit

Porcine platelet derived growth factor (PDGF) ELISA Kit 猪血小板衍生生长因子(PDGF)试剂盒

ELISA 小鼠Active Caspase-8  进口分装

CLIAKitforLPA(MouseL-phenylalanine)ELISAKit小鼠苯

通用型1毫升1厘米光径石英比色皿1个

ELISAKitEGF鸡表皮生长因子

兔内皮抑素(rabbit ES)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

兔内啡肽-b(rabbit Endorphin-b)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

兔雌二醇(rabbi E2)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

兔上腺素(rabbit EPI)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠浦肯野原代细胞小鼠胆囊收缩素8(CCK-8)试剂盒

Rat thrombin receptor () ELISA Kit 大鼠受体()试剂盒

HumanN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKIT 人N端前脑素(-proBNP)试剂盒 进口分装

HumanAialNaiureticPeptide,ANP试剂盒人心肽(ANP)试剂盒

植物源性食品羽扇豆(lupine)试剂盒20次

Humahrombopoietin，TPOELISAKit人血小板生成素(TPO)试剂盒

RBP4重组大鼠 RBP4 蛋白 Protein

HPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16 0.5mgHPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16) 人类状瘤病毒16抗原

PDE4B重组人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 标签) Protein

CLDN11 Protein Human 重组人 CLDN11 / Claudin-11 蛋白 (Fc 标签)

IFNA14 Protein Mouse 重组小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 (Fc 标签)