小鼠乳腺上皮原代细胞

小鼠乳腺上皮原代细胞

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

小鼠乳腺上皮细胞分离自乳腺组织；乳腺是复管泡状皮肤腺，主要由腺上皮细胞组成，并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期，导管末梢发育成腺泡；近年来的许多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的发生都与乳腺上皮细胞（MEC）有密切联系，体外分离培养MECs即成为研究开展的关键步骤。乳腺是乳房的腺体组织，乳腺由导管和腺泡组成，腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常发育是由体内激素和局部合成的生长因子共同调控，其中乳腺表达的生长因子对乳腺上皮细胞的增殖、分化、凋亡产生极大的影响。乳腺上皮细胞分离自分娩后3-5天的乳腺组织，为贴壁生长型细胞，呈多角形、圆形以及短梭形；乳腺上皮细胞主要功能即生乳功能。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠乳腺上皮细胞采用蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠乳腺上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

EPC, 大鼠血管内皮祖细胞  EB病毒转化的人B淋巴细胞(傣族);KM9405  牦牛皮肤细胞;BMU-S1  CL-0014A-375(人恶性黑色素瘤细胞)  人脑血管周细胞 (HBVP)  人黑色素瘤细胞;A875 大鼠肠上皮细胞 100mL 小鼠原代脊髓星形胶质细胞 小鼠原代结肠成纤维细胞

pre-X protein(CT 0.5mgpre-X protein(CT)[Hepatitis B virus C-Terminus] 乙肝病毒pre-X蛋白抗原(C端)

FGF7 Protein Human 重组人 FGF7 / FGF-7 / KGF 蛋白 (His 标签)

NA重组甲型流感 H9N2 神经酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein

DPP4 Protein Human 重组人 DPP4 / DPPIV / CD26 蛋白

TNFRSF1A重组人 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 蛋白 (His 标签) Protein

大鼠胰腺再生蛋白Ⅳ(REG4)试剂盒 ，英文名： REG4 ELISA Kit

Mouse endocrine gland vascular endothelial growth factor (EG-VEGF) ELISA Kit 小鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)试剂盒

MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISAKIT 小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumancytovillin/ezrin,CVLELISAKit人细胞绒毛蛋白/埃兹蛋白

细胞ARG/ABL2激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitC4a大鼠过敏毒素/补体片断4a

微量DNA凝胶回收试剂盒   50T

MiniELGelExactionKit   100T

微量样品   50T

MiniEleDNAKit   100T

小鼠乳腺上皮原代细胞小鼠7α-羟化酶(CYP7A1)试剂盒 96T/48T

Human placeal alkaline phosphatase (PLAP) ELISA Kit 人胎盘碱性0酸酶(PLAP)试剂盒

Humanai-thrombieceptor,AELISAKit 人抗受体(A)试剂盒 96T/48T 进口分装

humanAzidothymidine,AZT试剂盒人(AZT)试剂盒规格：96T/48T

植物源性饲料处理试剂盒20次

Humahrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit人抗复合物(TAT)试剂盒规格：96T/48T

EGF重组小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 标签) Protein

70kDa热休克蛋白1样蛋白(HSPA1L)重组蛋白 Recombinant Heat Shock 70kDa Protein 1 Like Protein (HSPA1L)

MKI67重组人 MKI67 蛋白 (GST 标签) Protein

CLIC4 Protein Human 重组人 CLIC4 蛋白

ACE2 Protein Rat 重组大鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白