小鼠神经少突胶质前体原代细胞

小鼠神经少突胶质前体原代细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2天半量换液1次

生长特性 贴壁

细胞形态 双极、多极形

传代特性 不传代，不增值，存活1-2周

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

小鼠神经少突胶质前体细胞分离自脑皮层组织；大脑分左右两个半球，大脑皮质（灰质）覆盖着每个大脑半球的大部分，它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。少突胶质细胞分布于中枢神经系统，在银浸染标本中，少突胶质细胞比星状胶质细胞小，其突起也较小而少，呈珠状，故被称为少突胶质细胞或寡突胶质细胞。少突胶质细胞（oligodendrocyte）是中枢神经系统（CNS）的成髓鞘神经胶质细胞，其发育要经历少突胶质细胞祖细胞、前少突胶质细胞祖细胞、未成熟和成熟少突胶质细胞等阶段。有学者将少突胶质细胞按其发育程度和形态分为三型。但是，细胞发育是一个连续的过程，其形态、表达产物和功能的演变没有严格的界限，因此，其分类是相对的。这三型分别为：Ⅰ型少突胶质细胞又称前O2A（pre-O2A progenitor cell）。细胞呈圆形，表面光滑，直径约3μm，体外混合培养时成簇生长在星形胶质表面，具有很强的分裂增殖潜力，表达GM1、波形蛋白和多唾液酸—神经粘附分子（polysialic acid-neural cell adhesion molecule，PSA-NCAM）等。Ⅱ型少突胶质细胞胞体常有双极或三极突起，极少数为单极突起，直径约7μm，有一定的分裂增殖能力。体外培养时为双潜能细胞，既可分化为少突胶质细胞又可分化为Ⅱ型星形胶质，故又称为少突胶质细胞-Ⅱ型星形胶质祖细胞（oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cell，O2A）。O2A除表达GM1和波形蛋白外还表达GD3和GQ（淋巴杂交瘤株A2B5产生GQ的抗体），故常用A2B5抗体标记O2A。Ⅲ型少突胶质细胞不再具有分裂增殖能力，为分裂终期细胞。直径约10μm。根据其形成髓鞘的能力，又分为不成熟的和成熟的两类少突胶质细胞。不成熟的OL胞体常伸出4～5条较粗大突起，表面还残留有A2B5标记物，同时也表达O1-O4抗原，无形成髓鞘的能力。成熟的少突胶质细胞突起有如蜘蛛网，大量表达半乳糖脑苷脂（galactocerebro side，GC）、蛋白脂蛋白（proteio lipid protein，PLP）、髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein，MBP）等，有对轴突髓鞘化的能力。体外培养的少突胶质细胞前体细胞（简称少突胶质细胞前体细胞）包括前O2A和O2A和未成熟少突胶质细胞，前两者具有增殖能力。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠神经少突胶质细胞采用蛋白酶消化、混合细胞营养缺失培养、摇床振荡结合差速贴壁法并通过专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠神经少突胶质前体细胞经A2B5免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

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FGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4 0.5mgFGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4) 纤维母细胞生长因子4抗原

FGFR2 Protein Human 重组人 FGFR2 / CD332 蛋白 (aa 400-821, His & GST 标签)

KIT重组大鼠 KIT / c-KIT 蛋白 Protein

EFNB1 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签)

TLK1重组人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 标签) Protein

大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP6)试剂盒 ，英文名： IGFBP6 ELISA Kit

Mouse endothelial niic oxide syhase 3 (eNOS-3) ELISA Kit 小鼠内皮型合成酶3(eNOS-3)试剂盒

MouseTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISAKIT 小鼠肿瘤坏死因子β(TNF-β)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanCyclin-D3ELISAKit人细胞周期素D3

细胞AURORA-A激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitON大鼠骨粘连蛋白

脱氧核糖核酸酶I   100mg

DNaseI,frombovinepancreas

三0酸脱氧核苷酸混合溶液   10x0.5ml

dPMix,10mMeach(dATP,dCTP,dGTP,dTTP)   100x0.5ml

小鼠神经少突胶质前体原代细胞小鼠丝酸/苏酸蛋酸酶(STK)试剂盒 96T/48T

Rat myosin (Myosin) ELISA Kit 大鼠肌球蛋白(Myosin)试剂盒

Humanneuraminidase,NAELISAKit 人神经酶(NA)试剂盒 96T/48T 进口分装

Duckai-prothrombinsaibodies,aPT1/aPT2试剂盒鸭抗凝血素抗体(aPT1/aPT2)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞样品蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

Mousedopamine,DAELISAKit小鼠多巴胺(DA)试剂盒规格：96T/48T

LIFR重组人 LIFR / CD118 蛋白 Protein

血红蛋白μ(HBμ)重组蛋白 Recombinant Hemoglobin Mu (HBm)

HA重组甲型流感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

CD3D Protein Human 重组人 CD3d / CD3 delta 蛋白

GP140 Protein HIV 重组人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC) (Fc 标签)