小鼠食管上皮原代细胞

小鼠食管上皮原代细胞

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

小鼠食管上皮细胞分离自食管组织；食管是咽和胃之间的消化管，食管在系统发生上起初很短，随着颈部的伸长和心肺的下降，而逐渐增长。食管可分为颈段、胸段和腹段。脊椎动物食管的颈段位于气管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之间的纵膈内，胸段通过膈孔与腹腔内腹相连，腹段很短与胃相连。在发育过程中，食管的上皮细胞增殖，由单层变为复层，食管使管腔变狭窄，甚至一度闭锁，以后管腔又重新出现。哺乳动物的食管结构上由内向外分四层：黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜。其中，黏膜层，包括上皮、固有层和黏膜肌层。上皮为较厚的未角化的复层扁平上皮，耐摩擦，有保护作用。在食管与胃贲门交界处，复层扁平上皮突然变成单层柱状上皮。食管被一层线性排列的、无角化、潮湿的复层扁平上皮细胞覆盖，其顶端细胞膜和细胞间连接复合体联合在一起产生有效渗透屏障，防止食管内容物的渗入。特别的是，层屏障使表层细胞的基质外侧细胞膜和深层细胞的全部细胞膜不暴露于食管腔内规律的大幅波动的渗透压之下。从组织学上讲，食管上皮由两层组成，基底层和分化层；其中，仅基底层的细胞可以增殖，然后向食管腔移行。移行过程伴随有分化的发生和分化标记的依序表达。食管上皮细胞的培养是研究食管正常生理机制和食管癌变机制的非常好的体外模型。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠食管上皮细胞采用机械分离法结合组织贴块法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠食管上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

FAM3D Others Human 人 FAM3D 人细胞裂解液   CEM细胞，白血病细胞 人前列腺癌细胞,PC-3M细胞 人肝内胆管上皮细胞总RNAHIBEpiC NA  肺大静脉内皮细胞Many   中国仓鼠卵巢细胞系;pDSr a2-mpl-X 小鼠原代颌骨骨髓间充质干细胞 大鼠原代乳腺导管上皮细胞

防御素β113(DEFβ113)重组蛋白 Recombinant Defensin Beta 113 (DEFb113)

CLIC4 Protein Human 重组人 CLIC4 蛋白

SEMA5A重组小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白 Protein

FCGRT & B2M Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白

TSPAN8重组人 TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 蛋白 (Fc 标签) Protein

大鼠氧鲨烯环化酶(OSC)试剂盒 ，英文名： OSC ELISA Kit

Mouse gelsolin (Gelsolin) ELISA Kit 小鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)试剂盒

MouseCiliaryNeuroophicFactor,CFELISAKit 小鼠睫状神经营养因子(CF)试剂盒 进口分装

CLIAKitforHumanComplemefragme5a,C5aELISAKit人补体片断5a

细胞CaMKII激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitOPG大鼠骨保护素

猪低分子肝素(LMWH)试剂盒     试剂盒   组装/原装

猪蛋白激酶A(PKA)试剂盒     试剂盒   组装/原装

猪胆囊收缩素/肠促肽(CCK)试剂盒     试剂盒   组装/原装

猪单核细胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)试剂盒     试剂盒   组装/原装

小鼠食管上皮原代细胞小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human mucosal addressin cell adhesion molecule (MAdCAM-1) ELISA Kit 人黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM-1)试剂盒

HumancytokeratinLowMolecularWeight,CK-LMWELISAKit 人低分子量细胞角蛋白(CK-LMW)试剂盒 96T/48T 进口分装

Guineapigierleukin4,IL-4试剂盒豚鼠白介素4(IL-4)试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性化学发光法定量试剂盒20次

Mousecarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit小鼠酶2(CA-2)试剂盒规格：96T/48T

M1重组甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Matrix protein 1 / M1 蛋白 Protein

PT141(Bremelanotide PT-141 1gPT141(Bremelanotide PT-141) 雌性激素肽

RELT重组人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 Protein

FSTL5 Protein Human 重组人 FSTL5 蛋白 (Fc 标签)

EFNA3 Protein Human 重组人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His & Fc 标签)