小鼠心脏干原代细胞

小鼠心脏干原代细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 长梭形

传代特性 可传2-3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

小鼠心脏干细胞分离自心脏组织；心脏是脊椎动物身体中重要的一个器官，主要功能是为血液流动提供压力，把血液运行至身体各个部分。心脏由心肌构成，左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开，故互不相通，心房与心室之间有瓣膜（房室瓣），这些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心脏的作用是推动血液流动，向器官、组织提供充足的血流量，以氧和各种营养物质，并带走代谢的终产物（如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等），使细胞维持正常的代谢和功能。研究发现，心脏干细胞是一种多潜能细胞，具有再生和克隆能力，并可分化为心肌细胞、平滑肌细胞和血管内皮细胞。体内研究显示，从心脏中分离出的心脏干细胞，经体外简单培养、增殖和标记后，移植到心肌梗死边缘区域，心梗血流动力学和心室壁厚度较对照组明显改善，心肌梗死边缘区域发现有标记的心肌细胞、平滑肌细胞和内皮细胞。尽管其新生心肌细胞较小，但表达一些特殊肌蛋白如心脏肌球蛋白重链、α-肌动蛋白、α-辅肌动蛋白、连接蛋白等，证实了心脏干细胞对心肌梗死的修复作用。干细胞移植治疗是目前心肌梗死和缺血性心脏病细胞重建的主要方法，成体干细胞中的c-kit阳性心脏干细胞因其来源于心脏，有定向心脏细胞系分化的趋势，体内外可以分化成心肌细胞、血管内皮细胞和平滑肌细胞，同时自体移植不存在免疫排斥反应及伦理问题已经成为目前研究的热点。短期内获得治疗量的自体心脏干细胞是这一治疗应用于临床的关键所在。因此，研究一种新的分离培养方法可在短时期内获得大量纯度较高的自体c-kit阳性心脏干细胞成为目前干细胞领域研究的热点问题之一。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠心脏干细胞采用机械剪碎组织、胶原酶分次消化法结合差速贴壁、心脏干细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠心脏干细胞经c-kit免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

GC-1, 鼠精原细胞  CTSE Others Mouse 小鼠 CTSE / Cathepsin-E 人细胞裂解液   长尾绿猴肾细胞;4647  HMC细胞，人肾小球系膜细胞 产EBV的绒猴白细胞,B95-8细胞 CL-0218SPC-A-1(人肺癌细胞)  95-C 小鼠原代骨膜干细胞 人原代肾上腺包膜成纤维细胞

Bursin 囊素三肽/三肽囊素/鸡法氏囊三肽 100mgBursin 囊素三肽/三肽囊素/鸡法氏囊三肽

CTNNB1 Protein Human 重组人 beta-Catenin / CTNNB1 蛋白 (His & GST 标签)

CD36重组小鼠 CD36 / SCARB3 蛋白 Protein

NTRK1 Protein Rat 重组大鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 标签)

CCL15重组人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 标签) Protein

大鼠血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)试剂盒 ，英文名： ANGPTL2 ELISA Kit

Mouse prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit 小鼠前列腺素E2(PGE2)试剂盒

Mouseangiopoietieceptoie1,ANG-R-Tie1ELISAkit 小鼠血管生成素受体Tie1(ANG-R-Tie1)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanCA724ELISAKit人肿瘤标志物

细胞C-TAK激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitM-AChR大鼠受体

小鼠抗平滑肌抗体(ASMA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠胚胎干细胞系MESPU30(M30)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κBp65)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠心脏干原代细胞小鼠脑脊髓病毒(TMEV)试剂盒 96T/48T

Skin reactive factor / inflammatory factor (SRF/IF) ELISA Kit 人皮肤反应因子/性因子(SRF/IF)试剂盒

Humaetinoblastomatumorsuppressorprotein,pRBELISAKit 人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)试剂盒 96T/48T 进口分装

Human5-hydroxyindolaceticacid,5-HIAA试剂盒人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)试剂盒规格：96T/48T

真菌NADPH氧化酶活性比色法定量试剂盒20次(10样本)

MouseAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit小鼠抗Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)试剂盒规格：96T/48T

LCN2重组大鼠 LCN2 / NGAL 蛋白 Protein

HDAC1/HD1(histone deacetylase 1 0.5mgHDAC1/HD1(histone deacetylase 1) 组织蛋白去乙酰化酶1抗原

DSC2重组人 DSC2 / Desmocollin-2 蛋白 Protein

EPHA2 Protein Human 重组人 EphA2 蛋白 (aa 585-976, His & GST 标签)

CD79B Protein Mouse 重组小鼠 CD79B / B29 蛋白