大鼠胚肺成纤维原代细胞

大鼠胚肺成纤维原代细胞

培养信息：

包被条件

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠胚肺成纤维细胞分离自胚肺组织；肺是机体的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆盖于心之上。肺有分叶，左二右三，共五叶。肺经肺系（指气管、支气管等）与喉、鼻相连，故称喉为肺之门户，鼻为肺之外窍。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的胚肺成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。该细胞在合成和分泌细胞因子、维持血管内外和凝血和纤溶的的动态平衡中起重要作用。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠胚肺成纤维细胞采用蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠胚肺成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

IFNA4 Others Rat 大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 人细胞裂解液   人少突胶质前体细胞裂解物HOPCL  肝窦内皮细胞Many   猪晶状体上皮细胞PlEpiC  H1299   人肺腺癌细胞  P19 小鼠畸胎瘤细胞 兔原代子宫内膜上皮细胞 大鼠原代胰腺星状细胞

CK18(Cytokeratin 18 0.5mgCK18(Cytokeratin 18) 细胞角蛋白18(多肽)

CFL2 Protein Human 重组人 CFL2 / cofilin 2 / ADF 蛋白

LGMN重组小鼠 Legumain/ LGMN 蛋白 Protein

VSIG4 Protein Mouse 重组小鼠 VSIG4 蛋白 (His & Fc 标签)

PARP3重组人 PARP-3 / PARP3 蛋白 (His & GST 标签) Protein

大鼠糖蛋白A33(GPA33)试剂盒 ，英文名： GPA33 ELISA Kit

Mouse glucoprotein 130 (gp130) ELISA Kit 小鼠糖蛋白130(gp130)试剂盒

RatEsadiol,E2ELISAKit 大鼠雌二醇(E2)试剂盒 进口分装

CLIAKitforHLE(Humanleukocyteexastase)ELISAKit人白细胞弹性蛋白酶

细胞PKC激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitCNP大鼠C型尿肽

小鼠25羟基D3(25(OH)D3/25HVD3)试剂盒     试剂盒   组装/原装

小鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)试剂盒     试剂盒   组装/原装

小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)试剂盒     试剂盒   组装/原装

小鼠Ⅰ型胶原N末端肽(X)试剂盒     试剂盒   组装/原装

大鼠胚肺成纤维原代细胞小鼠高密度脂蛋白(HDL)试剂盒

Human leptin (LEP) ELISA Kit 人瘦素(LEP)试剂盒

HumanleukoieneE4,LT-E4ELISAKit 人白三烯E4(LTE4)试剂盒 进口分装

humanAi-ThyroidMicrosomeAibody,ATMA/TMAB试剂盒人抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)试剂盒

植物性食物样品处理试剂盒20次

humanansfusionansmittedvirus,TTVELISAKit人输血传播病毒/辛型肝病毒((TTV)试剂盒

ACVR1C重组食蟹猴 ALK-7 / ALK7 / ACVR1C 蛋白 (Fc 标签) Protein

MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor 0.5mgMGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT) 层粘连蛋白受体1抗原(C端)

NEGR1重组人 NEGR1 蛋白 Protein

CBLC Protein Human 重组人 Cbl-c / CBL-3 蛋白 (His & GST 标签)

FLT3LG Protein Mouse 重组小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 蛋白 (Fc 标签)