大鼠卵巢成纤维原代细胞

大鼠卵巢成纤维原代细胞‍

培养信息：

包被条件

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠卵巢成纤维细胞分离自卵巢组织；卵巢是雌性动物的生殖器官，卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同，仅左侧发育（右侧已退化），呈葡萄状，均为处于不同发育时期的卵泡，卵泡呈黄色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢，但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构，而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官，它的外表有一层上皮组织，其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成；髓质位于中央，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管、淋巴管和神经。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的卵巢成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。卵巢成纤维细胞大多分布于卵巢表面，其主要特点和功能：①成纤维细胞在体外易于培养；②卵巢损伤后，成纤维细胞能修复和重塑卵巢；③能在卵巢炎症时有效控制炎症扩散。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠卵巢成纤维细胞采用蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠卵巢成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

HT-1080(人纤维肉瘤细胞)   HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Malaysia/2506/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液   人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38]  BEL-7404人肝癌细胞 小鼠附睾脂肪干细胞永生化细胞 人原代鼻咽癌相关成纤维细胞

FOXJ1/HFH-4 peptide 插头蛋白J1抗原 0.5mgFOXJ1/HFH-4 peptide 插头蛋白J1抗原

GPX7 Protein Human 重组人 GPX7 / Glutathione Peroxidase 7 蛋白 (Fc 标签)

SEMA4D重组大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 蛋白 Protein

EPHB4 Protein Mouse 重组小鼠 EphB4 / HTK 蛋白

SULT1A1重组人 SULT1A1 / STP1 蛋白 Protein

大鼠尾加压素2受体(S2R)试剂盒 ，英文名： S2R ELISA Kit

Mouse fibroblast growth factor 1 (aFGF-1) ELISA Kit 小鼠酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)试剂盒

MouseIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 小鼠白介素2受体(IL-2R)试剂盒 进口分装

CLIAKitforHSCCAg-2(umanSquamousCellCarcinomaAigen2)ELISAKit人鳞状上皮细胞癌抗原2

细胞NLK激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitβ-EP大鼠β内啡肽

小鼠特异生长因子试剂盒   小鼠特异生长因子试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠特异生长因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠特异生长因子试剂盒、小鼠特异生长因子试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠坏死因子试剂盒   小鼠坏死因子试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠坏死因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠坏死因子试剂盒、小鼠坏死因子试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠总补体试剂盒   小鼠总补体试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠总补体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠总补体试剂盒、小鼠总补体试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠总腺原酸试剂盒   小鼠总腺原酸试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠总腺原酸试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠总腺原酸试剂盒、小鼠总腺原酸试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

大鼠原代卵巢成纤维细胞小鼠抗利尿激素/血管加压素/精酸加压素(ADH/VP/AVP)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat ai sperm aibody (AsAb) ELISA Kit 大鼠抗抗体(AsAb)试剂盒

HumanconcanavalinA,ConAELISAKit 人刀A(ConA)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanangiopoietin-likeprotein3,ANGPTL3试剂盒人血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)试剂盒规格：96T/48T

植物钙ATP酶(Ca++-ATPase)活性比色法定量试剂盒20次

IL-1αELISAKit鱼类白介素1α(IL-1α)试剂盒规格：96T/48T

MAPK1重组小鼠 ERK2 / MAPK1 / MAPK2 蛋白 (His & GST 标签) Protein

促肾上皮质激素释放激素(CRH)重组蛋白 Recombinant Corticotropin Releasing Hormone (CRH)

GUCA1A重组人 GCAP1 / GUCA1A 蛋白 Protein

FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 标签)

TNFRSF14 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 HVEM / TNFRSF14 蛋白