大鼠胚胎成纤维原代细胞

大鼠胚胎成纤维原代细胞

培养信息：

包被条件

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠胚胎成纤维细胞分离自胚胎；成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的胚胎成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。该细胞常用作ES细胞培养常用的饲养层细胞，能产生抑制ES细胞自主分化和促进ES细胞增殖的因子，故能有效地促进ES细胞的增殖并维持其未分化特性和多潜能性，且分泌效果优于外源添加的一些因子，而且可以为ES细胞的培养提供类似于体内的微环境，故在研究哺乳动物ES细胞中得到广泛使用。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠胚胎成纤维细胞采用蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠胚胎成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

IFNA8 Others Human 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人细胞裂解液   E.G7-OVA(小鼠T淋巴瘤细胞)     猪细胞;ST  星形细胞生长添加物SteCGS  大鼠癌细胞;MADB106  MDA-MB-231(ATCC来源), 人癌细胞 兔原代子宫内膜间质细胞 小鼠原代三叉神经元细胞

MMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7 0.5mgMMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7) 基质金属蛋白酶-7(抗原)

FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 标签)

YWHAB重组食蟹猴 14-3-3 beta / YWHAB 蛋白 Protein

ESM1 Protein Mouse 重组小鼠 ESM1 / Endocan 蛋白 (His 标签)

MMP8重组人 MMP-8 / CLG1 蛋白 Protein

大鼠胎球蛋白B(FETUB)试剂盒 ，英文名： FETUB ELISA Kit

Mouse glucocoicoid receptor beta (GR- beta) ELISA Kit 小鼠糖皮质激素受体β(GR-β)试剂盒

RatCalcitonin,CTELISAKit 大鼠降钙素(CT)试剂盒 进口分装

CLIAKitforHLA-A(HumanleukocyteaigenA)ELISAKit人类白细胞抗原A

细胞PKG-Iβ激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitBF大鼠B因子

小鼠17-类固醇(17-KS)试剂盒   96T/48T

小鼠17羟孕(17-OHP)试剂盒   96T/48T

小鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)试剂盒   96T/48T

小鼠16α羟基雌1(16-αOHE-1)试剂盒   96T/48T

大鼠胚胎成纤维原代细胞小鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA 试剂盒

Human aquaporin 2 (AQP-2) ELISA Kit 人水通道蛋白2(AQP-2)试剂盒

Humancholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 人酯转移蛋白(CETP)试剂盒 进口分装

Humanapelin13,AP13试剂盒人apelin13(AP13)试剂盒

植物氧化应激活性氧(ROS)荧光测定试剂盒(次氯酸离子)20次

Humaotalprostatespecificaigen,tPSAELISAKit人总前列腺特异抗原(tPSA)试剂盒

ACPP重组小鼠 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 蛋白 Protein

半乳糖凝集素4(GAL4)重组蛋白 Recombinant Galectin 4 (GAL4)

AK4重组人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 Protein

FLRT1 Protein Human 重组人 FLRT1 蛋白

IFNGR1 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 蛋白