大鼠牙龈成纤维原代细胞

大鼠牙龈成纤维原代细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠牙龈成纤维细胞分离自牙龈组织；牙龈指紧贴于牙颈周围及邻近的牙槽骨上淡红色的结构，由复层扁平上皮及固有层组成。是口腔黏膜的一部分，血管丰富，呈淡红色，坚韧而有弹性，因缺乏黏膜下层，直接与骨膜紧密相连，故牙龈不能移动。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠牙龈成纤维细胞采用蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠牙龈成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

KM小鼠未分化神经胶质瘤瘤株;B22  Caco-2(人结直肠腺癌细胞)     EPHB2 Others Human 人 EphB2 / Hek5 (aa 570-987) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液   HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Brisbane 兔原代胸腺成纤维细胞 兔原代前列腺基底细胞

丝蛋白酶1(PRSS1)重组蛋白 Recombinant Protease, Serine 1 (PRSS1)

GCK Protein Human 重组人 Glucokinase / GCK 蛋白

IL1RL1重组人 IL1RL1 / DER4 蛋白 Protein

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

KIRREL重组人 KIRREL / NEPH1 / KIRREL1 蛋白 (Fc 标签) Protein

大鼠上皮性钙黏附蛋白(CDHE)试剂盒 ，英文名： CDHE ELISA Kit

Mouse cardiac anscription factor GATA4 ELISA Kit 小鼠心肌转录因子GATA4 试剂盒

RatSomatostatin,SSELISAKit 大鼠(SS)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHAMA(Humanaimousaibody)ELISA人抗鼠抗体

细胞半胱蛋白酶-6(CASPASE-6)活性比色法定量试剂盒20次

RatVitaminA,VAELISAKit大鼠A(VA)试剂盒规格：96T/48T

兔子Ⅲ型胶原(ColⅢ)试剂盒   96T/48T

兔子Ⅱ型胶原(ColⅡ)试剂盒   96T/48T

兔子Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)试剂盒   96T/48T

兔子Ⅰ型胶原(ColⅠ)试剂盒   96T/48T

大鼠牙龈成纤维原代细胞小鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human blood coagulation factor XII (F XII) ELISA Kit 人Ⅻ(FⅫ)试剂盒

Humanpro-gasin-releasingpeptide,ProGRPELISAKit 人胃泌素释放肽前体(ProGRP)试剂盒 96T/48T 进口分装

Human20-hydroxyeicosateaenoicacid,12-HETE试剂盒人12羟二十烷四烯酸(12-HETE)试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母纤维二糖酶(cellobiase)活性比色法定量试剂盒20次

MouseApolipoproteinH,Apo-HELISAKit小鼠载脂蛋白H(Apo-H)试剂盒规格：96T/48T

NMNAT1重组人 NMNAT1 / NMNAT 蛋白 Protein

SPAG5/map126 相关抗原5(多肽抗原 0.5mgSPAG5/map126 相关抗原5(多肽抗原)

GPC3重组人 Glypican 3 / GPC3 / OCI-5 蛋白 Protein

HIST2H4A Protein Human 重组人 Histone H4 / HIST2H4A 蛋白

PTPN1 Protein Human 重组人 PTP1B / PTPN1 蛋白