大鼠前列腺成纤维原代细胞

大鼠前列腺成纤维原代细胞

培养信息：

包被条件

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠前列腺成纤维细胞分离自前列腺组织；前列腺（Prostate）是雄性的性腺器官；前列腺是不成对的实质性器宫，由腺组织和肌组织构成。前列腺如栗子，底朝上，与膀胱相贴，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面贴耻骨联合，后面依直肠。前列腺腺体的中间有尿道穿过，扼守着尿道上口，所以，前列腺有问题时，排尿首先受影响。前列腺是机体非常少有的，具有内、外双重分泌功能的性分泌腺。作为外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是构成精液主要成分；作为内分泌腺，前列腺分泌的激素称为“前列腺素"。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的前列腺成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠前列腺成纤维细胞采用蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠前列腺成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人细胞裂解液   RPE Others Human 人 RPE / RPE2-1 人细胞裂解液   兔源细胞  新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞;NBTF  MMP8 Others Mouse 兔原代椎体终板软骨干细胞 兔原代淋巴管成纤维细胞

次0酸核糖基转移酶1(HPRT1)重组蛋白 Recombinant Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1)

FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 标签)

S100A9重组小鼠 S100A9 / CAGB / p14 蛋白 (His 标签) Protein

IFNAR1 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (His 标签)

ALOX15B重组人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白 Protein

大鼠酸性成纤维细胞生长因子(FGF1)试剂盒 ，英文名： FGF1 ELISA Kit

Mouse ferritin (FE) ELISA Kit 小鼠铁蛋白(FE)试剂盒

ratEndothelin1,ET-1ELISAKit 大鼠内皮素1(ET-1)试剂盒 进口分装

CLIAKitforhiston-H2bELISAKit大鼠组蛋白H2b

细胞ROCK-I激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitPⅢNP大鼠Ⅲ型前胶原肽

小鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)试剂盒     试剂盒   组装/原装

小鼠Ⅲ型前胶原基端肽(PⅢ)试剂盒     试剂盒   组装/原装

小鼠Ⅲ型胶原(ColⅢ)试剂盒     试剂盒   组装/原装

小鼠Ⅱ型胶原(ColⅡ)试剂盒     试剂盒   组装/原装

大鼠前列腺成纤维原代细胞豚鼠生长激素(GH)试剂盒 ，英文名： GH ELISA Kit

Human nerve growth factor (NGF) ELISA Kit 人的神经生长因子(NGF)试剂盒

MonkeyLaminin,LNELISAKit层连蛋白/板层素(LN)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBLAPELISAKit(Rabbit)兔骨碱性0酸酶试剂盒

细菌耐酸(ACID-FAST)染色试剂盒50次

rabbitmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit兔子巨噬细胞性蛋白5(MIP-5)试剂盒规格：96T/48T

HA重组甲型流感 H1N1 (A/Solomon Islands/3/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

Shadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor 0.5mgShadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor) 新朊蛋白/朊蛋白相关蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白抗原

S100A6重组人 S100A6 / CACY 蛋白 Protein

CISD1 Protein Human 重组人 CISD1 / ZCD1 蛋白

IL35 Protein Human 重组人 IL-35 (IL12A & IL27B) 蛋白 (Fc 标签)

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。