大鼠支气管平滑肌原代细胞

大鼠支气管平滑肌原代细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠支气管平滑肌细胞分离自支气管组织；支气管（Bronchi），是指由支气管分出的各级分枝，由支气管分出的一级支气管，即左、右主支气管。左主支气管与右主支气管相比较，前者较细长，走向倾斜；后者较粗短，走向较前者略直，所以经支气管堕入的异物多进入右主支气管。支气管和支气管还有以区别就是，支气管是以“C"型的支气管软骨为支架，而支气管不是。支气管平滑肌细胞主要功能：①支气管平滑肌细胞能维持支气管张力，保持支气管形态；②支气管平滑肌特异的超微结构特点和调节机制是支气管正常生理功能的基础；③支气管平滑肌通过分泌细胞因子和趋化因子等促炎介质，发挥免疫调节功能。支气管平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠支气管平滑肌细胞采用蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠支气管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

LAN-5细胞，神经母细胞瘤细胞 人胎盘绒毛癌细胞,JAR细胞 人表皮角质细胞RNAHEK miRNA5 μg  胰腺癌组织源性原代细胞Many 1ml  786-O[786-0]细胞，肾透明细胞腺癌细胞 单核细胞白血病细胞,J-111细胞 兔原代小肠粘膜上皮细胞 人原代淋巴管内皮细胞

Claudin-11 peptide 少突胶质细胞跨膜蛋白抗原 0.5mgClaudin-11 peptide 少突胶质细胞跨膜蛋白抗原

HIST3H2A Protein Human 重组人 HIST3H2A / Histone H2A 蛋白

CD5L重组小鼠 CD5L / CD5 antigen-like 蛋白 Protein

VCAM1 Protein Mouse 重组小鼠 VCAM1 / CD106 蛋白 (His & Fc 标签)

RELA重组人 RELA / Transcription factor p65 / NFkB p65 蛋白 (aa 1-306, GST 标签) Protein

大鼠肉毒碱棕榈酰基转移酶2(CPT2)试剂盒 ，英文名： CPT2 ELISA Kit

Mouse angiotensinogen (aGT) ELISA Kit 小鼠血管紧张素原(aGT)试剂盒

RatThyroglobulin,TGELISAKit 大鼠甲状腺球蛋白(TG)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforGzms-A(MousegranzymesA)ELISAKit小鼠颗粒酶A

细胞长链羟脂酰脱氢酶(HYDROXYACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量试剂盒20次

Raturokinaseplasminogenactivator,uPAELISAKit大鼠型纤溶酶原激活物(uPA)试剂盒规格：96T/48T

兔粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rabbit GM-CSF)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

兔肝细胞生长因子(rabbit HGF)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

兔透明质酸(rabbit HA)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

兔心脂肪酸结合蛋白(rabbit H-FABP)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

大鼠支气管平滑肌原代细胞小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat maix metalloproteinase 2/ gelatinase A (MMP-2/Gelatinase A) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)试剂盒

HumanNeuronalChemorepelleSlit2ELISAKit 人神经生长导向因子Slit2试剂盒 96T/48T 进口分装

DuckIerleukin2,IL-2试剂盒鸭白介素2(IL-2)试剂盒规格：96T/48T

枣椰树(datepalm)培养基500毫升溶液/片剂

MouseDehydroepiandrosterone,DHEAELISAKit小鼠脱氢表雄同(DHEA)试剂盒规格：96T/48T

GAD2重组小鼠 GAD65 / GAD2 蛋白 Protein

骨成型蛋白4(BMP4)重组蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4)

SHPK重组人 CARKL / SHPK 蛋白 (His & GST 标签) Protein

HMGB1 Protein Human 重组人 HMGB1 / HMG1 蛋白

TNFRSF9 Protein Canine 重组狗 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白 (Fc 标签)

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。