永生化人肝癌血管内皮细胞系；ECDHCC-1保存条件

永生化人肝癌血管内皮细胞系；ECDHCC-1保存条件冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。

细胞名称
形态特性  上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。 
培养条件   10%FBS
传代方法  无
传代情况 1:3传代，3-4天传1次
冻存条件  C5
支原体检测 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
STR  阴性
同工酶 
染色体  未做
培养温馨提示：
1）公司努力实现为科学研究提供实验细胞技术服务。所提供的实验细胞及其子代，不能用于人体实验和临床诊断、治疗。
2）公司细胞资源中心承诺尽zui大努力对实验细胞资源相关信息进行及时更新。但限于我们的技术条件，中心不保证其准确性。
3）从文献等处引用的信息本中心未进行核实，仅供参考。
4）使用者在接收、处理、保存、丢弃、转让及使用细胞的时候要遵守国内外有关的法律法规，充分考虑可能存在的风险和责任，采取适当的安全和处理措施尽量降低对健康或环境的危害。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

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