SV40T转化人脐静脉内皮细胞；PUMC-HUVEC-T1生长特性

SV40T转化人脐静脉内皮细胞；PUMC-HUVEC-T1生长特性注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用公司细胞库细胞株种类齐全：大鼠腹水癌细胞、肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人宫颈癌细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等。细胞状态良好，饱满，光泽度好，*，专业技术指导，另有细胞培养类产品胎牛血清、小牛血清、DMSO、双抗、胰酶、DMEM、1640培养基、细胞培养瓶等产品。欢迎广大科研用户！

细胞名称 SV40T转化人脐静脉内皮细胞；PUMC-HUVEC-T1生长特性
形态特性  上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性  PUMC-HUVEC-T1形态呈现为典型的鹅卵石样排列，已证明在体外可传至40代。PUMC-HUVEC-T1内皮标记vWF、CD31、CD34均阳性，可结合凝集素，电镜下可见紧密连接和W-P小体，Matrigle上可形成管型。不同代数的HUVEC-T1细胞核型正常稳定（P12、P13、P19、P38），裸鼠体内接种不成瘤（P9和P33）。 
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS 40μU/L胰岛素 + 40U/ml 肝素 + 1% NEAA
传代方法  1:3～1:4传代，一周1～2次
传代情况 P12
冻存条件  基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：11，12；D13S317：11，13；D16S539：9，12；D18S51：16，17；D21S11：28，30；D2S1338：17，19；D3S1358：15，17；D5S818：11，13；D6S1043：11，14；D7S820：8，11；D8S1179：13，14；FGA：24；Penta E：15，17；vWA：14，16；
同工酶 
染色体  46，XX
使用权限 A类

复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

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