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详细介绍
试剂配制：
1、酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、标记抗体（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水25倍。
10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
注：本公司提供试剂盒免费代测服务。需要其他检测试剂盒请咨询销售人员。
产品全称：BAGE5 B-黑色素瘤抗原5检测试剂盒
英文名称：B-Melanoma Antigen 5(BAGE5)ELISA Kit
货号：GOY-01E13475
规格：48T/96T
服务：可提供免费代测服务，以及产品说明书和技术指导等
保存环境：2-8℃低温、避光、防潮
主要成分：酶标板,试剂,标准品等。
检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..需要而未提供。
具有如下优点：
一、高效、灵敏、特异的抗体；
二、稳定的重复性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；
五、性价比非常好，节省实验经费。
试剂和样本的控制方法：
一、试剂 1.试剂的选择：国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关，我司严格按照进行，已获得国家承认的“三证"，每一个产品都有对应的批号，只要客户提前下单，我们就能为您提供新批次的产品，不必担心会有过期的试剂。我司的试剂，值得您选择。 2.试剂的准备：先将试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置20-30 min后，再进行测定，使试剂盒在使用前与室温平衡，这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度，以满足后面的测定需求。
| 二、样本 1.内源性干扰因素：包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等； 类风湿因子的控制方法： ①用F(ab)2替代完整的IgG； ②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理； ③检测抗原时，可用加入到标本中使RF降解。 |
操作步骤：
1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。
2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本40μL(即样本5倍)；空白对照孔不加。
4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。
6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50μL，空白对照孔不加。
7、温育：重复4的操作。
8、洗板：重复5的操作。
9、显色：每孔先加入显色剂A 液50μL，再加入显色剂B液 50μL，37℃避光显色15min。
10、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。
11、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。
12、计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以倍数。
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