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详细介绍
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| 骨髓单个核细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1369 |
商品介绍：
名称 骨髓单个核细胞 2.组织来源：骨髓 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 人骨髓单个核细胞分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓单个核细胞是骨髓中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞和单核细胞。注意这里是（mononuclear cell）单个核细胞，而不是（Monocyte）单核细胞。单个核细胞的体积、形态和比重与骨髓其他细胞不同，利用一定比例聚蔗糖和泛影酸钠形成的等渗溶液作密度梯度离心，使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，可将各种血细胞与单个核细胞分离。 5.方法简介： 实验室分离的人骨髓单个核细胞采用取骨髓、通过密度梯度离心法制备而来制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： 实验室分离的人骨髓单个核细胞经检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-H238 换液频率每2-3天换液一次 生长特性半贴壁半悬浮 细胞形态圆形 传代特性不增殖；不传代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠 CD3d / CD3 delta 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
IFN omega 1 / IFNW1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CD27 / TNFRSF7 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 LILRA5 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 HepaCAM2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 TNFSF15 / TL1A 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 BACE2 / Beta secretase 2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 FcERI / FCER1A 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
SLITRK6 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
骨髓单个核细胞Saccharomyces cerevisiaeMutY同源物检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae解整合素金属蛋白8检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae还原型辅Ⅰ检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae磷脂酰肌检测试剂盒
Candida parapsilosis蛋白S检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae蛋白C检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiaeCXC趋化因子配体14检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae巨噬集落激因子1受体检测试剂盒
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