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详细介绍
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| 胎盘羊膜细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X0877 |
商品介绍：
名称 胎盘羊膜细胞 2.组织来源：胎盘组织 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 人胎盘羊膜细胞分离自胎盘组织；胎盘（placenta）是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官，由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育，依靠胎盘从母体取得营养，而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素，是一个重要的内分泌器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代，胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合，以达到母子间物质的交换，这样的结构称假胎盘。羊膜是胎盘的最内层，与眼结膜组织结构相似，含有眼表上皮细胞，包括结膜细胞和角膜上皮细胞生长所需要的物质，其光滑，无血管、神经及淋巴，具有一定的弹性；在电镜下，其分为五层：上皮层、基底膜、致密层、纤维母细胞层和海绵层，羊膜基底膜和羊膜羊膜基质层含有大量不同的胶元，主要为Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型胶原和纤维粘连蛋白、层粘连蛋白等成份。羊膜细胞主要由羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞组成，均具有多分化潜能，可转化为神经元，且还有合成、释放生物活性物质和神经营养因子的功能。 5.方法简介： 实验室分离的人胎盘羊膜细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： 实验室分离的人胎盘羊膜细胞经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 包被条件PLL（0.1mg/ml） 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-H050 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态梭形、多角形 传代特性可传3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠 AGER 基因全长ORF克隆
小鼠 RETN 基因全长ORF克隆
小鼠 SCF 基因全长ORF克隆
小鼠 CD209B 基因全长ORF克隆
小鼠 CLU 基因全长ORF克隆
小鼠 S100A4 基因全长ORF克隆
小鼠 SIRT5 基因全长ORF克隆
小鼠 EGF 基因全长ORF克隆
小鼠 LDLR 基因全长ORF克隆
小鼠 IL4I1 基因全长ORF克隆
胎盘羊膜细胞0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Low-density lipoprotein receptor-related protein 5
78-5000 pg/mL 虾特定基因序列(FC)核酸检测试剂盒
0.625-40 ng/mL 人Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Apolipoprotein L1
0.156-10 ng/mL 人蛋硫氧化物还原B(MSRB)ELISA试剂盒
0.156-10 ng/mL 人α血红蛋白稳定蛋白(AHSP)ELISA试剂盒
0.156-10 ng/mL 人转化生长因子β受体1(TGFR-1)ELISA试剂盒
31.2-2000 pg/mL 去(Noradrenaline) ELISA试剂盒
0.78-50 ng/mL 人卵泡抑素样蛋白3(FSTL3)ELISA试剂盒
0.312-20 ng/mL 人真核翻译起始因子2-α激3(EIF2AK3)ELISA试剂盒
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