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详细介绍
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| 小鼠骨髓单核细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1205 |
商品介绍：
名称 小鼠骨髓单核细胞 2.组织来源：骨髓 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 小鼠骨髓单核细胞分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓单核细胞是一种未成熟的单核细胞，在骨髓细胞中约占0.04%，被认为是破骨细胞的前体细胞，较外周血单个核细胞诱导的破骨细胞得率高、全骨髓诱导法产生的破骨细胞数量多，纯度高，较脾细胞诱导法分化效率高。骨髓单核细胞（BMMNCs）是从股骨或胫骨骨髓中分离提取出来的原代细胞，它属干细胞类型。目前，大多数研究用淋巴细胞分离液分离提取骨髓单核细胞，最近也有采用免疫磁珠分离法分离骨髓单核细胞。 5.方法简介： 实验室分离的小鼠骨髓单核细胞采用密度梯度离心法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： 实验室分离的小鼠骨髓单核细胞经CD68免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M172 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态巨噬细胞样 传代特性不增殖；不传代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
Syndecan-2 / SDC2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
FOXP2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
小鼠 CD40L / TNFSF5 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
NGFR 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
TFF1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签
SULT2A1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
SULT2B1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
SULT1E1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
类呼吸道合胞病毒 hRSV (subtype A, strain Long) Fusion glycoprotein / RSV-F 基因全长ORF克隆 (密码子优化) (表达载体), 带FLAG标签
PD1 / PDCD1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
小鼠骨髓单核细胞小鼠甲基化Anti-SEPTIN14 Antibody高迁移率族蛋白B1检测试剂盒
人抗肝膜抗体Anti-SEPHS2 Antibody高铁血红蛋白检测试剂盒
大鼠血纤蛋白原降解产物Anti-SENP8 Antibody睾酮检测试剂盒
小鼠抗增殖核抗原抗体Anti-SEPTIN1 Antibody弓形虫IgG抗体检测试剂盒
大鼠血栓调节蛋白Anti-SEPTIN2 Antibody弓形虫IgM抗体检测试剂盒
人抗肝特异性脂蛋白抗体Anti-SEPTIN3 Antibody钩端螺旋体IgG抗体检测试剂盒
人抗眼肌抗体Anti-SEPTIN3 Antibody钩端螺旋体IgM抗体检测试剂盒
大鼠血小板衍生生长因子Anti-SEPTIN7 Antibody孤啡肽检测试剂盒x
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