详细介绍
细胞实验步骤:
一、细胞复苏
1.将10ml移液管、移液枪、1ml枪头、50ml离心管、T25培养瓶、酒精灯、废液缸等物品放入超净工作台,紫外灯照射30min后再通风30min;
2.预热培养基;
3.用75%酒精消毒后放入超净工作台;
4.将冻存细胞从液氮罐中取出;
5.放入一次性手套于37℃水浴锅中快速晃动使其融化;
6.用75%酒精消毒后放入超净工作台;
7.吸取9ml培养基到50ml离心管中;
8.用1ml枪头吸取解冻的细胞悬液于离心管中;
9.1000r/min,离心5min;
10.用75%酒精消毒后放入超净工作台;
11.吸弃上清液;
12.吸取1ml培养基重悬细胞,将细胞悬液转移到培养瓶内,补加适量培养基,轻轻晃动培养瓶使细胞分布均匀,并做好标记;
13.在显微镜下观察复苏的细胞密度及状态;
14.将细胞放回二氧化碳培养箱中静置培养。
商品属性:
产品名称 | 原代皮肤成纤维细胞(湖羊)专用培养基 | 规格 | 100mL/500mL |
产品分类 | 原代细胞专用培养基 | 货号 | GOY-XP3742 |
羊原代皮肤成纤维细胞培养基由团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持羊原代皮肤成纤维细胞优良的生长状态。
本产品中已包含羊原代皮肤成纤维细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用羊原代皮肤成纤维细胞的培养。
名称 | 体积 | 浓度 | 保存条件 |
原代成纤维细胞基础培养基 | 500ml | 1× | 4℃、避光 |
原代成纤维细胞培养添加剂 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 50ml | 终浓度10% | -20℃、避光 |
注意事项:
仅限科研用。
培养体系中的一些组分是对人体健康有害的物质,请不要用暴露的皮肤接触培养体系的液体和有培养体系的液体残留的容器内部;这部分有害物质的浓度和危害性都较低,如有接触,立即用自来水冲洗即可。
公司正在出售的产品:
RAD23同源物B(RAD23B)重组蛋白 Recombinant RAD23 Homolog B (RAD23B)
CD160 Protein Human 重组人 CD160 蛋白
TNFRSF4重组小鼠 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 (Fc 标签) Protein
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Porcine ierleukin 10 (IL-10) ELISA Kit 猪白介素10(IL-10)试剂盒
甲型副氏菌(SPA)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforMIC-1humanELISAkit人巨噬细胞抑制因子-1试剂盒
体液镁离子(Mg)浓度化学比色法定量试剂盒50次
ELISAKitSAA牛血清淀粉样蛋白A
心脂肪酸结合蛋白 英文名称: hea fatty acid-binding protein 规格: 英文缩写: H-FABP
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富组酸糖蛋白 英文名称: rich in histidine glycoprotein 规格: 英文缩写: HPRG
血液结合素 英文名称: Hemopexin 规格: 英文缩写: HPX
小鼠胰岛细胞抗体(ICA)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human leptin soluble receptor (sLR) ELISA Kit 人可溶性瘦素受体(sLR)试剂盒
HumanComplemefragme3b,C3bELISAKit 人补体片断3b(C3b)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitfor3-(Human3-Niotyrosine)ELISAKit人3-硝基酪
饮料(CO2)浓度酶偶联反应比色法定量试剂盒20次
MouselymphocytefactorELISAKit小鼠淋巴细胞因子试剂盒规格:96T/48T
AF750标记的多巴胺受体D1抗体
转运蛋白SEC62抗体
原代皮肤成纤维细胞(湖羊)专用培养基CSRP1重组小鼠 CSRP1 / CSRP / CRP1 蛋白 Protein
酶Ⅱ(CA2)天然蛋白 Native Carbonic Anhydrase II (CA2)
CFHR2重组人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 蛋白 Protein
CD160 Protein Human 重组人 CD160 蛋白
MDH1 Protein Rat 重组大鼠 MDHA / MDH1 蛋白
细胞培养步骤:
细胞复苏:
从液氮罐中取出冻存细胞,迅速放入37℃水浴中解冻。
解冻后,将细胞转移到含有新鲜培养基的培养皿中,轻轻摇动使细胞均匀分布。
放入37℃、5%CO2的培养箱中培养。
细胞换液:
吸除或倒掉培养皿内的旧培养液。
加入PBS缓冲液,轻轻漂洗细胞,以去除悬浮在细胞表面的碎片,重复几次。
加入新的培养基。
细胞传代:
当细胞长到80%~90%时,进行传代。
吸除或倒掉瓶内旧培养液,加入PBS缓冲液漂洗。
加入消化液,轻轻摇动使消化液流遍所有细胞表面。
将培养瓶放入37℃培养箱中静止几分钟,观察细胞变化。当细胞间隙增大后,加入含有血清的培养液终止消化。
吹打细胞使其成为悬液,转移到离心管中离心。
弃上清,加入适量的细胞培养液重悬细胞。
按比例分装到新的培养皿中,补加新鲜培养基。
做好标记,放入37℃、5%CO2的培养箱中培养。
细胞冻存:
选择对数生长期的细胞进行冻存。
将细胞转移到离心管中离心,弃上清。
加入适量的冻存液(如90%的培养基+10%的DMSO),轻轻吹打重悬细胞。
将细胞转移到冷冻保存管中,标记后放入程序降温盒,再放入-80℃冰箱冻存。几小时后或过夜转至液氮罐保存。