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C2C12 (小鼠成肌细胞)

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更新时间:2025-02-23 19:52:18浏览次数:411

联系我们时请说明是化工仪器网上看到的信息,谢谢!

产品简介

供货周期 现货 规格 1×10⁶cells/T25培养瓶
货号 GOY-01X0044 应用领域 化工
主要用途 产品仅供科研使用    
C2C12 (小鼠成肌细胞)的相关*:假单胞分离琼脂 250(g)
Bromocresol-purple azide broth 溴红紫叠氮肉汤 1.03032.0500MERCK默克
RPMI 1640,(1X),液体 ( IVD) 不含L-21870-076
Tryptic Soy Broth
OF basal medium acc.to HUGH and LE

详细介绍

公司细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

产品名称

C2C12 (小鼠成肌细胞)

规格

1×10⁶cells/T25培养瓶

货号

GOY-01X0044

产品介绍:

名称    C2C12 (小鼠成肌细胞)

别称C2c12; C2-C12; C12

种属小鼠

年龄(性别)不详

组织来源骨骼肌;品系:C3H

生长特性贴壁细胞

细胞形态成肌细胞样

背景描述C2C12细胞是由D·YaffeO·Saxel建立的小鼠成肌细胞株的亚克隆;C2C12细胞分化很快,形成可伸缩的肌管并生成特征性的肌蛋白。用骨形成蛋白2(BMP-2)处理C2C12细胞,会导致C2C12细胞的分化途径从成肌细胞转换为成骨细胞。检测表明,C2C12细胞肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。

生物安全等级1

生长培养基DMEM10% FBS1% P/S

推荐传代比例1:3-1:4

推荐换液频率2~3/

倍增时间~20小时

冻存条件

冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度:液氮

培养条件

气相:空气,95%CO25%

温度:37℃

注意事项该细胞贴壁松散,操作时请尽量轻柔;换液时需预热培养基;收货如有大块脱落的细胞团,为正常现象,请按照收货注意事项处理。

细胞特点及处理:

产品特点:

1、 使用方便:不需昂贵设备。

2、 可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。

3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。

4、 采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。

5、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。

6、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。

7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。

8、 本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等兼容。

细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3.6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4.将细胞悬液按1215的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

QQ截图20210907103850.png

 

细胞培养技巧:

一、冻存时的注意事项:

1. 在冷冻保存之前,应观察细胞生长是否良好(log phase) 且存活率高,冻存的细胞密度为80 – 90 %最佳

2. 冷冻前检测细胞是否保有其*性质,例如是否有杂细胞或者支原体等。

3. 使用的DMSO 应为试剂级等级,以5~10 ml 小体积分装,4 度避光保存,勿作多次解冻。使用的甘油也应为试剂级等级,以高压蒸汽

灭菌后避光保存。在开启后一年内使用,因长期储存后对细胞会有毒性。

4. 冷冻保存的细胞浓度:

4-1. 正常的成纤维细胞: 1-3x 10^6 cells/ml

4-2 杂交瘤细胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,细胞浓度不要太高,某些杂交瘤会因冷冻浓度太高而在解冻24 小时后。

4-3.贴壁肿瘤细胞: 1 x 10^6,依细胞种类而异。腺癌类的细胞解冻后须较高之浓度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml

4-4. 悬浮细胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴类细胞须至少5 x 10^6 cells/ml

5. 冷冻保护剂浓度为5 %10 DMSO,若是不确定细胞之冷冻条件,在做冷冻保存之同时,亦应作一个backup culture,以防止冷冻失败。

 

下列是公司正销售的产品:

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鱼脱氢表雄酮(DHEA)免疫试剂盒进口、组装

C2C12 (小鼠成肌细胞)艾格LT100肉汤  250g

1瓶 Ishikawa细胞株 Ishikawa 低温运输和保存

1000mL Tris Buffered Saline(TBS),10X,pH7.6  Tris Buffered Saline(TBS),10X,pH7.6  常温保存

1mL Protein G磁珠  

2 ug pTracer CMV2 pTracer CMV2 低温运输,-20℃保存

200mL 菌体内毒素清除剂 Bacterial Endotoxin Erasol 常温

2 ug pDsRed2-Peroxi pDsRed2-Peroxi 低温运输,-20℃保存

使用方法:

收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。

2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。

3. 细胞传代

1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;

3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:21:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃5% CO2细胞培养箱中培养;

4) 待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。

 

 


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