M14 (黑色素瘤细胞)

M14 (黑色素瘤细胞)的相关*：体液氧化应激活性氧（ROS）比色法测定试剂盒（单线态氧气） 20次
植物氧化应激活性氧（ROS）比色法测定试剂盒（单线态氧气） 20次
单线态氧气清除（scavenging）活性比色法筛选试剂盒 20次
细胞内氧化应激活性氧（ROS）荧光测定试剂盒（单线态氧气） 20次
组织氧化应激活性氧（ROS）荧光测定试剂盒（单线态氧气） 20次
体液氧化应激

产品属性： 

商品介绍：

冷冻保存细胞之方法？

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。

冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；

2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；

3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；

4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；

5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

鸡碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)免疫试剂盒现货供应

大鼠白三烯C4(LTC4)免疫试剂盒*直销

牛骨成型蛋白受体1B(BMPR-1B)免疫试剂盒现货供应

牛α1酸性糖蛋白(α1-AGP)免疫试剂盒进口、组装

补体片断3a(C3a)免疫试剂盒进口、分装

黄氧化(XOD)免疫试剂盒*直销

酐3(CA3)免疫试剂盒进口、组装

神经调节蛋白3(NRG3)免疫试剂盒现货供应

大鼠白介素6(IL-6)免疫试剂盒现货供应

游离前列腺特异性抗原(fPSA)免疫试剂盒现货供应

M14 (黑色素瘤细胞)25mL Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (reducing,4X)   Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (reducing,4X)   常温保存

1 mg Quin-2 AM Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

2 ug pLentiCRISPR cas9 v.2 pLentiCRISPR cas9 v.2 低温运输，-20℃保存

HC琼脂基础 HC Agar Base 250g

1瓶 MNNG/HOSCl#5 [R-1059-D]细胞株 MNNG/HOSCl#5 [R-1059-D] 低温运输和保存

A1培养基 A1 Medium 250g

500mg 人血清白蛋白 V Albumin Human Serum, FractionⅤ 4℃保存